T-2毒素ELISA檢測試劑盒_美國REAGEN貨號RNM 98002    T2毒素檢測試劑盒    T2 Toxin ELISA Test Kit    96T    美國REAGEN T-2毒素檢測試劑盒是用競爭性酶聯(lián)免疫的方法定量分析谷類、飼料、干肉、干魚、種子、牛奶中T-2毒素，齊一生物科技?xì)g迎您訂購咨詢.手機.在線咨詢:1091367877

1T-2毒素ELISA檢測試劑盒_美國REAGEN．試劑盒描述

REAGEN^™T-2毒素檢測試劑盒是用競爭性酶聯(lián)免疫的方法定量分析谷類、飼料、干肉、干魚、種子、牛奶中T-2毒素，該試劑盒有以下特點

• 高回收率（75-115%），快速（10-20min），成本低
• 高靈敏度（1ppb）
• 高重復(fù)性。
• 檢測過程只需要不到1小時。

2．試劑盒原理

REAGEN^™T-2毒素檢測試劑盒基于競爭性酶聯(lián)免疫檢測原理，毒素抗原包被在酶標(biāo)板孔內(nèi)，分析過程中，樣品和一抗、酶標(biāo)二抗加入微孔中，如果樣品中有毒素抗原，就可競爭與抗體結(jié)合，阻止抗體與包被的抗原結(jié)合，酶標(biāo)二抗可與一抗結(jié)合從而于酶標(biāo)板上包被的抗原結(jié)合。經(jīng)酶催化底物發(fā)生反應(yīng)顏色變化，顏色的深淺與目標(biāo)物的濃度成反比。

3. 試劑盒組成部分和儲存

已包被抗原的酶標(biāo)板(T-2 Toxin Coated Plate)（可拆式）             12×8 孔

標(biāo)準(zhǔn)液(Standards)（0，1，5，10，25，50 ppb）                      6×1.0mL

回收用100ng/ml(Spiking)(可選）                                   1×1.0ml

一抗(T-2 Toxin Antibody #1)                                       1×8ml

1×HRP酶標(biāo)二抗(HRP-Conjugated Antibody #2)                        1×8ml

20×濃縮洗液(Wash Solution)                                       1×30mL

終止液(Stop Buffer)                                               1×20mL

TMB底物(TMB Substrate)                                           1×10mL

本試劑盒應(yīng)當(dāng)在2-8℃的溫度下儲存，有效期為一年。如果超過1個月不使用試劑盒，請將標(biāo)準(zhǔn)品、一抗、二抗于-20°C保存。

4.檢測下限

5.交叉反應(yīng)：

6．未提供的設(shè)備或材料

• 酶標(biāo)儀(450nm)
• 勻漿器
• 漩渦振蕩器
• 移液器(10、20和100mL，1mL各一支)
• 多道移液器（50-300mL）
• 甲醇
• 乙酸乙酯

7.注意事項

實驗前請閱讀以下文字，以保證獲得實驗效果。

• 標(biāo)準(zhǔn)品中含有T-2毒素，請小心使用。
• 不要使用過期的試劑盒。
• 不同批次的試劑盒不要混用，抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。
• 盡量保持室溫（22.5±2.5）°C，避免在通風(fēng)口操作防止溫度過低，過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的，不要在陽光直射下實驗，防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間，如果工作臺溫度過低，應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料。

• 水質(zhì)量很重要，確保使用蒸餾或者去離子水。
• 加入樣品或者試劑到空的微孔板時，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接觸。
• 孵育時間的計算越規(guī)范越好，保持添加標(biāo)準(zhǔn)品的*性，先添加標(biāo)準(zhǔn)品后添加樣品。
• 從低濃度到高濃度地添加標(biāo)準(zhǔn)品，降低影響標(biāo)準(zhǔn)品曲線質(zhì)量的風(fēng)險。
• 將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中，冷藏保存。
• 確保洗板正確，洗板充分。

8．樣品的準(zhǔn)備

所有的試劑在使用之前應(yīng)將其回溫室溫，并在使用試劑前搖動幾下，以保證合理的濃度。

干肉/魚/谷物/飼料/種子

快速提取方法

• 研磨并混勻適量的樣品；
• 稱取5g磨碎的樣品，放入適當(dāng)?shù)娜萜髦校?/span>
• 加入25mL70%甲醇，用手或者振蕩器劇烈振蕩20分鐘；
• 室溫（22.5±2.5）°C下4000 rpm離心10分鐘；
• 取1mL上清液，加入1mL蒸餾水或者去離子水稀釋；
• 取50μL作檢測。

稀釋倍數(shù)：10

備注：如果需要，樣品所取的量可以增加，同時甲醇/水的用量也必須作相應(yīng)的改變。例如取10g樣品，應(yīng)該加入50mL70%甲醇。

    有機提取方法(針對高背景值樣品或用快速提取回收率低的樣品)

• 取適量樣品用勻漿器勻漿；
• 稱取2g樣品；
• 加入500mg NaCL,6ml乙酸乙酯，渦流1分鐘或振蕩10分鐘；
• 室溫（22.5±2.5）°C 4000rpm離心10分鐘。
• 移取1ml上清液到新的試管中，60°C 水浴下氮氣吹干。
• 取333μL35%的甲醇溶解干燥物，加入1ml正己烷，渦流一分鐘。
• 室溫（22.5±2.5）°C 4000rpm離心10分鐘。
• 棄去上層液，每孔取50μL下層液用于檢測。

稀釋倍數(shù)：1

牛奶

• 脫脂牛奶：用35%甲醇做10倍稀釋（20mL牛奶+180mL 35%甲醇），每孔取50mL用于檢測。
• 含脂牛奶：使用前需要室溫（22.5±2.5）°C 下以4000rpm離心5分鐘除去上層脂肪層，再用35%甲醇做10倍稀釋（20mL牛奶+180mL 35%甲醇），每孔取50mL用于檢測。

       稀釋倍數(shù)：10

9．酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試步驟

試劑準(zhǔn)備：

注意：試劑在使用之前要在室溫下解凍1-2小時，確定在使用前閱讀過注意事項。準(zhǔn)備適量的檢測用試劑，所有的試劑搖勻后使用。準(zhǔn)備足夠所有小管所需的用量，不能將試劑倒回原來的瓶子中，處理試劑時建議用廢棄的瓶子以降低污染的風(fēng)險。

1x洗液的制備

1體積的20x洗液同19體積的蒸餾水混合

檢測：

以下為計算份量的表格，用戶可根據(jù)自己的需要來確定需要配置多少試劑。

• 加入50mL的標(biāo)準(zhǔn)品于所設(shè)定的孔中。
• 加入50mL的樣品于所設(shè)定的孔中。
• 每孔加入50mL 1×二抗然后再加入50mL一抗，震蕩混勻1分鐘。
• 室溫（22.5±2.5）°C下避光孵育30分鐘。
• 300mL 1×洗液洗板3次，zui后一次洗板后，將酶標(biāo)板倒置用力甩干。
• 加入100mL TMB底物，混勻1分鐘。

• 室溫（22.5±2.5）°C避光孵育15分鐘，加入100mL終止液。
• 450nm下讀數(shù)(讀數(shù)前，用無絨布擦拭除去微孔底部的水分和指痕)。需輔導(dǎo)歡迎