植物前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒

性能:

1．準確性：標(biāo)準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2．靈敏度：zui低檢測濃度小于10 pg/ml。

3．特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4．重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

 植物前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒

1. 標(biāo)準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 

釋。 

48μmol/L 5 號標(biāo)準品 150μl 的原倍標(biāo)準品加入150μl 標(biāo)準品稀釋液 

24μmol/L 4 號標(biāo)準品 150μl 的5 號標(biāo)準品加入150μl 標(biāo)準品稀釋液 

12μmol/L 3 號標(biāo)準品 150μl 的4 號標(biāo)準品加入150μl 標(biāo)準品稀釋液 

6μmol/L 2 號標(biāo)準品 150μl 的3 號標(biāo)準品加入150μl 標(biāo)準品稀釋液 

3μmol/L 1 號標(biāo)準品 150μl 的2 號標(biāo)準品加入150μl 標(biāo)準品稀釋液 

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準孔、 

待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl， 

然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡 

量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。 

4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此 

重復(fù)5 次，拍干。 

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 

7. 溫育：操作同3。 

8. 洗滌：操作同5。 

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色 

10 分鐘. 

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。 

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 

液后15 分鐘以內(nèi)進行。 

 植物前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒

標(biāo)本要求 

1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能 

馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融 

2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 

3.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 

4.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。 

5.  細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 

6.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。 

7.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 

組成 

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶 

2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準品（96μmol/L） 0.5ml×1 瓶 

3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準品稀釋液 1.5ml×1 瓶 

4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份 

5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張 

6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個 

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