◆ 走進(jìn)HMSiR-tubulin

HMSiR-tubulin（硅基羅丹明熒光染料-微管蛋白）屬于一類自發(fā)閃爍型近紅外熒光微管蛋白探針，將羥甲基硅羅丹明（HMSiR）染料的獨(dú)特光物理特性與卡巴他賽（cabazitaxel）的微管蛋白靶向結(jié)合能力進(jìn)行了有效整合，在活細(xì)胞與固定細(xì)胞的單分子定位顯微（SMLM）、受激發(fā)射損耗（STED）顯微及MINFLUX納米顯微成像等基礎(chǔ)科研場景中具有重要應(yīng)用價值。

該探針由三部分構(gòu)成：HMSiR熒光團(tuán)作為近紅外報告基團(tuán)，其核心特征是存在熒光態(tài)與非熒光態(tài)（螺環(huán)醚態(tài)）之間的平衡，在生理pH（約7.4）下平衡強(qiáng)烈偏向暗態(tài)，僅一小部分分子處于熒光態(tài)，從而產(chǎn)生自發(fā)閃爍現(xiàn)象?？ò退悾╟abazitaxel） 作為微管蛋白結(jié)合配體，可高親和力結(jié)合微管蛋白的紫杉烷結(jié)合位點(diǎn)。C6連接臂將兩者橋接，連接臂長度對探針的細(xì)胞膜通透性和脫靶積累具有顯著影響。

◆ 核心參數(shù)速覽

中文名稱：硅基羅丹明熒光染料-微管蛋白、HMSiR-微管蛋白探針

英文名稱：HMSiR-tubulin, Hydroxymethyl Silicon-Rhodamine-tubulin

外觀/性狀：深藍(lán)色至藍(lán)黑色固體粉末

純度：≥95%

溶解性：溶于DMSO、DMF等有機(jī)溶劑，可在細(xì)胞培養(yǎng)液中分散

保存條件：-20°C避光、干燥密封保存，避免反復(fù)凍融

激發(fā)/發(fā)射波長：約650 nm（激發(fā)）/ 約673 nm（發(fā)射）

適用儀器：SMLM單分子定位顯微鏡、STED超分辨顯微鏡、MINFLUX納米顯微鏡、共聚焦顯微鏡

科研實驗室：西安凱新生物

◆ 性能亮點(diǎn)

HMSiR-tubulin的核心優(yōu)勢在于其自發(fā)閃爍特性與細(xì)胞膜通透性的整合，使其成為活細(xì)胞超分辨成像的理想工具。

自發(fā)閃爍機(jī)制：HMSiR染料在生理pH下處于熒光態(tài)與暗態(tài)的動態(tài)平衡中，僅約1-3%的分子處于熒光態(tài)，產(chǎn)生時間上稀疏分布的發(fā)光事件。這一特性無需添加任何切換緩沖液或化學(xué)添加劑即可實現(xiàn)單分子水平的定位，適用于SMLM成像。

細(xì)胞膜通透性與靶向性：HMSiR-tubulin在活細(xì)胞中表現(xiàn)出良好的膜通透性，可特異性染色微管結(jié)構(gòu)。在多種探針的對比篩選中，HMSiR-tubulin（探針3）在活細(xì)胞中染色亮度最高。其對微管蛋白的表觀解離常數(shù)（Kd,app）約為121 nM，與經(jīng)典紫杉烷類探針Flutax的親和力范圍（10-100 nM）相當(dāng)。

超分辨成像兼容性：該探針可同時適用于SMLM、STED（775 nm損耗激光）和MINFLUX三種納米顯微技術(shù)，實現(xiàn)技術(shù)間的可互換使用。在MINFLUX成像中，其小尺寸（約2 nm）允許以約2.3 nm的定位精度記錄圖像。

脫靶染色較低：在CTX系列探針中，HMSiR-tubulin的脫靶染色（主要是酸性囊泡積累）最少，表現(xiàn)出最佳的成像特異性。

◆ 應(yīng)用場景

該試劑主要適用于活細(xì)胞微管動態(tài)追蹤（在活U-2 OS細(xì)胞中以100 Hz幀率采集閃爍圖像，可連續(xù)觀察微管生長和縮短動態(tài)超過4分鐘）、固定細(xì)胞超分辨成像（在固定細(xì)胞中可實現(xiàn)35±6 nm的微管半高全寬分辨率，MINFLUX成像中定位精度約2.3 nm）、神經(jīng)元微管成像（可用于活小鼠神經(jīng)元的2D和3D STED納米顯微成像）以及原代小膠質(zhì)細(xì)胞微管觀察（已有標(biāo)準(zhǔn)化實驗方案用于固定和活原代小膠質(zhì)細(xì)胞的微管及微管末端觀察）。

◆ 操作與安全須知

該產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究使用。操作人員應(yīng)穿戴實驗服、手套及護(hù)目鏡。使用后的廢棄物按相關(guān)化學(xué)廢棄物處理規(guī)范處置。

◆ 同類試劑推薦

SiR-tubulin（硅基羅丹明-微管蛋白探針，非閃爍型）

HMSiR-tubulin（自發(fā)閃爍型硅基羅丹明-微管蛋白探針）

SiR-actin（硅基羅丹明-肌動蛋白探針）

6-SiR-o-C9-CTX（共價型磺鎓連接臂微管蛋白探針）

Flutax-1（熒光紫杉醇衍生物）

紫杉醇（Paclitaxel）

卡巴他賽（Cabazitaxel）

多西他賽（Docetaxel）

HMSiR-COOH（羥甲基硅羅丹明羧酸，染料前體）

SiR-HaloTag配體（硅基羅丹明-HaloTag配體）

◆ 聲明

溫馨提示：本試劑僅面向科研場景，由西安凱新生物有限公司YNN匯編整理。