人P21蛋白(P21)ELISA試劑盒使用說明書

　　產(chǎn)品名稱：人P21蛋白(P21)定量檢測試劑盒(ELISA)

　　用途：定量檢測人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中P21蛋白的含量。

　　檢測原理：采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，通過標準品和樣本的OD值計算P21蛋白濃度。

　　試劑盒組成

　　組分 規(guī)格(48T) 規(guī)格(96T)

　　預(yù)包被酶標板 8×6條8×12條

　　標準品(6管 )0.3ml/管0.3ml/管

　　20倍濃縮洗滌液 25ml50ml

　　樣本稀釋液 6ml12ml

　　酶標試劑 6ml12ml

　　顯色劑A/B液各 3ml各6ml

　　終止液 6ml12ml

　　實驗步驟

　　樣本準備

　　血清/血漿：使用無熱原試管收集，避免溶血，2-8℃保存48小時或-20℃長期保存。

　　組織勻漿：離心去除懸浮物，稀釋至檢測范圍內(nèi)。

　　試劑配制

　　洗滌液：蒸餾水1:20稀釋濃縮液(如1ml濃縮液+19ml蒸餾水)。

　　標準品：按梯度稀釋(48/24/12/6/3/1.5 ng/L) 。

　　加樣與孵育

　　標準品孔：加入50μl標準品;樣本孔：10μl樣本+40μl稀釋液(5倍稀釋) 。

　　37℃避光孵育30分鐘，洗滌4次。

　　顯色與檢測

　　加入酶標工作液，37℃孵育30分鐘，洗滌后加TMB顯色液，避光孵育15分鐘。

　　加入終止液，立即測定OD450值。

　　注意事項

　　試劑盒僅限科研使用。

　　避免反復(fù)凍融樣本，洗滌時需拍干殘留液滴。

　　標準品需現(xiàn)配現(xiàn)用，顯色后需立即終止反應(yīng)。

　　數(shù)據(jù)計算

　　根據(jù)標準品OD值繪制標準曲線，樣本濃度通過線性回歸方程計算。

　　檢測范圍：1.5-48 ng/L^^1^^。

　　靈敏度：<0.5 ng/mL(超靈敏試劑盒) 。

　　附錄

　　P21蛋白功能：細胞周期調(diào)控因子，與腫瘤抑制和DNA修復(fù)相關(guān)。

　　相關(guān)產(chǎn)品：PAK4重組蛋白(貨號BES4007K)可用于對照實驗。

　　注：以上資料僅供參考，具體產(chǎn)品信息請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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