大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒實驗使用說明書
以下是關于大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南：
BS-3458 大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法測定標本中T4水平。通過純化的大鼠T4抗體包被微孔板形成固相抗體，依次加入樣本、HRP標記的T4抗體形成復合物，經TMB顯色后測定450nm吸光度(OD值)，其顏色深淺與T4濃度呈正相關。
二、試劑盒組成
組分 48孔配置 96孔配置 保存條件
酶標包被板 1×48孔 1×96孔 2-8℃
標準品(270μg/L) 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃
酶標試劑 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃
顯色劑A/B液 各3ml×1瓶 各6ml×1瓶 2-8℃
終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃
濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃
三、樣本處理要求
血清：室溫靜置2小時或4℃過夜后，1000×g離心20分鐘取上清，避免反復凍融
血漿：EDTA/肝素抗凝采集，30分鐘內2-8℃ 1000×g離心15分鐘
組織勻漿：PBS沖洗后稱重剪碎，按重量體積比1:9加入生理鹽水勻漿，2000-3000轉/分離心20分鐘取上清
四、操作步驟
加樣：標準品/樣本加入對應孔，建議做復孔
孵育：37℃溫育30分鐘
洗滌：甩干孔內液體，每孔加滿洗滌液靜置30秒后甩干，重復5次
加酶標試劑：每孔50μl，37℃避光孵育30分鐘
顯色：依次加入顯色劑A/B各50μl，37℃避光反應15分鐘
終止：每孔加終止液50μl
檢測：450nm波長測定OD值(建議5分鐘內完成)
五、結果計算
以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標繪制標準曲線
樣本濃度=標準曲線對應值×稀釋倍數(shù)
檢測范圍：0.703-45ng/ml，靈敏度0.422ng/ml
六、注意事項
試劑使用前需平衡至室溫(20-25℃)
不同批號試劑不得混用
濃縮洗滌液出現(xiàn)結晶時需37℃溶解后使用
有效期6個月，2-8℃保存，避免反復凍融
七、技術支持
部分廠商提供免費代測服務及無效退換承諾，具體可咨詢供應商。
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