IVD試劑凍干曲線開發(fā)與關(guān)鍵溫度測試

1. IVD試劑凍干曲線開發(fā)

凍干曲線是凍干過程的關(guān)鍵指導(dǎo)文件，包含預(yù)凍、一次干燥（升華干燥）和二次干燥（解析干燥）三個階段的溫度-時間關(guān)系  。

l  預(yù)凍階段：需根據(jù)共晶點確定低的溫度（通常低于共晶點5-10℃），并控制降溫速率（速凍或慢凍）。例如，5-氮雜胞苷-D-甘露醇溶液共晶點為-6.54℃，預(yù)凍溫度選定為-25℃

l  一次干燥（升華干燥）：溫度需低于共熔點（如-1.67℃），真空度控制在10-30 Pa，升溫速率通常為2℃/min。如尿促性素一次升華溫度為-12.5℃，維持70分鐘

l  二次干燥（解析干燥）：需緩慢升溫至更高溫度（如20-40℃），確保殘留水分都去除。例如，硼替佐米二次升華階段溫度分別于5℃、20℃和40℃維持300分鐘、110分鐘和220分鐘

2. IVD試劑關(guān)鍵溫度測試

凍干關(guān)鍵溫度測試是確定凍干曲線的基礎(chǔ)，主要包括以下參數(shù)：

l  共晶點測試：

n  DSC熱分析法：通過差示掃描量熱儀測定，如5-氮雜胞苷-D-甘露醇溶液的共晶點為-6.54℃

n  電阻法：當(dāng)物料冷凍溫度降至某一值，物料全部凍結(jié)，電阻突然增大，該溫度即為共晶點

l  共熔點測試：通過DSC測定，當(dāng)溫度升至某一值時冰晶開始熔化，該溫度即為共熔點l  玻璃化轉(zhuǎn)變溫度測試：通過DSC測定，如GGT試劑的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為-18.75℃

l  塌陷溫度測試：

n  凍干顯微鏡法：實時觀察凍干過程中樣品結(jié)構(gòu)變化，當(dāng)干燥層溫度上升到某一臨界值時，固體基質(zhì)的剛性不足以維持蜂窩狀結(jié)構(gòu)，空穴的固形物基質(zhì)壁發(fā)生塌陷，該臨界溫度即為塌陷溫度

n  介電分析法：通過介電性能的變化判定塌陷溫度