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◆ 走進(jìn)FITC-PEG-NHS與Biotin-PEG-NHS
FITC-PEG-NHS(熒光素-聚乙二醇-活性酯)與Biotin-PEG-NHS(生物素-聚乙二醇-活性酯)屬于一類NHS酯功能化PEG衍生物系列,在蛋白質(zhì)標(biāo)記、納米載體表面功能化及生物分子偶聯(lián)等基礎(chǔ)科研場(chǎng)景中具有廣泛應(yīng)用。該系列試劑的核心結(jié)構(gòu)由三部分構(gòu)成:NHS活性酯基團(tuán)、親水性聚乙二醇間隔臂以及末端功能基團(tuán)(FITC或Biotin)。NHS酯是一種高效的胺反應(yīng)性基團(tuán),可在溫和條件下(pH 7.0-8.5)與伯胺發(fā)生親核取代反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵,將PEG鏈共價(jià)連接至含胺基的目標(biāo)分子或表面。PEG鏈段賦予分子良好的水溶性、生物相容性和空間柔性,可有效降低非特異性吸附。末端功能基團(tuán)的差異決定了兩種試劑不同的應(yīng)用場(chǎng)景:FITC提供綠色熒光示蹤功能;Biotin提供親和捕獲功能。
◆ 核心參數(shù)速覽
FITC-PEG-NHS
中文名稱:熒光素-聚乙二醇-活性酯、FITC-PEG-琥珀酰亞胺酯
英文名稱:FITC-PEG-NHS, Fluorescein-PEG-NHS
分子量:常見(jiàn)1k、2k、3.4k、5k、10k Da等多種規(guī)格
外觀/性狀:黃色至橙黃色固體粉末或粘稠液體(取決于分子量)
純度:≥95%
溶解性:溶于水、DMSO、DMF等極性溶劑
保存條件:-20°C避光、干燥密封保存
激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng):約495 nm(激發(fā))/ 約520 nm(發(fā)射)

Biotin-PEG-NHS
中文名稱:生物素-聚乙二醇-活性酯、Biotin-PEG-琥珀酰亞胺酯
英文名稱:Biotin-PEG-NHS, Biotin-PEG-Succinimidyl Ester
分子量:常見(jiàn)0.4k、0.6k、1k、2k、3.4k、5k、10k Da等多種規(guī)格
外觀/性狀:白色至類白色固體粉末或粘稠液體(取決于分子量)
純度:≥95%

溶解性:溶于水、DMSO、DMF等極性溶劑
保存條件:-20°C避光、干燥密封保存
共同參數(shù)
適用儀器:高效液相色譜儀、核磁共振波譜儀、動(dòng)態(tài)光散射儀、熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀
科研實(shí)驗(yàn)室:西安凱新生物
◆ 性能亮點(diǎn)與核心差異
FITC-PEG-NHS與Biotin-PEG-NHS的核心區(qū)別在于末端功能基團(tuán)的生物學(xué)功能,兩者均以NHS酯為胺反應(yīng)性偶聯(lián)基團(tuán)、PEG為親水間隔臂。
FITC-PEG-NHS 將綠色熒光示蹤功能與NHS酯的胺反應(yīng)性進(jìn)行了整合。FITC(異硫氰酸熒光素)是一種經(jīng)典的綠色熒光染料,激發(fā)峰約在495 nm,發(fā)射峰約在520 nm,具有高量子產(chǎn)率和良好的光穩(wěn)定性,與標(biāo)準(zhǔn)的FITC/GFP濾光片組兼容。通過(guò)NHS端與含伯胺的目標(biāo)分子偶聯(lián),可將FITC-PEG鏈引入目標(biāo)體系,賦予其綠色熒光示蹤功能。PEG鏈段可有效改善標(biāo)記物的水溶性,降低非特異性吸附。該試劑適用于需要熒光成像或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn),如蛋白質(zhì)定位、細(xì)胞攝取追蹤及納米載體示蹤。
Biotin-PEG-NHS 將生物素的高親和力捕獲功能與NHS酯的胺反應(yīng)性進(jìn)行了整合。生物素(維生素B7)與鏈霉親和素的結(jié)合親和力高,這一特性使其成為生物分子捕獲、純化與檢測(cè)中廣泛使用的親和標(biāo)簽。通過(guò)NHS端與含伯胺的目標(biāo)分子偶聯(lián),可將生物素-PEG鏈引入目標(biāo)體系,賦予其親和捕獲功能。PEG間隔臂可有效減少生物素與鏈霉親和素結(jié)合時(shí)的空間位阻。該試劑適用于需要親和純化、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)或免疫熒光檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)。
兩種試劑均以NHS酯為胺反應(yīng)性偶聯(lián)基團(tuán)、PEG為親水間隔臂。選擇依據(jù)主要取決于應(yīng)用目標(biāo)——若需熒光示蹤與成像,選擇FITC-PEG-NHS;若需親和捕獲與檢測(cè),選擇Biotin-PEG-NHS。
◆ 應(yīng)用場(chǎng)景
該系列試劑主要適用于蛋白質(zhì)與多肽的PEG化標(biāo)記、納米載體表面功能化以及生物分子檢測(cè)與捕獲等基礎(chǔ)科研場(chǎng)景。
FITC-PEG-NHS 適用于含伯胺蛋白質(zhì)、多肽或納米載體的綠色熒光標(biāo)記。通過(guò)NHS端與目標(biāo)分子上的伯胺反應(yīng),引入FITC-PEG鏈,賦予目標(biāo)分子綠色熒光示蹤功能。標(biāo)記后的蛋白可通過(guò)共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行檢測(cè)和定位。也適用于脂質(zhì)體、聚合物納米粒等納米載體的熒光標(biāo)記與細(xì)胞攝取追蹤。
Biotin-PEG-NHS 適用于含伯胺蛋白質(zhì)、多肽或納米載體的生物素化PEG修飾。通過(guò)NHS端與目標(biāo)分子上的伯胺反應(yīng),引入生物素-PEG鏈,賦予目標(biāo)分子親和捕獲功能。在ELISA、流式細(xì)胞術(shù)或Western blot中,生物素化分子可通過(guò)鏈霉親和素-酶或鏈霉親和素-熒光探針進(jìn)行檢測(cè)和信號(hào)放大。也適用于制備生物素化磁珠或親和純化基質(zhì)。
◆ 操作與安全須知
操作人員應(yīng)穿戴實(shí)驗(yàn)服、手套及護(hù)目鏡,使用后的廢棄物按相關(guān)化學(xué)規(guī)范處置。
◆ 同類試劑推薦
• FITC-PEG-NHS(熒光素-聚乙二醇-活性酯)
• Biotin-PEG-NHS(生物素-聚乙二醇-活性酯)
• FITC-PEG-NH?(熒光素-聚乙二醇-氨基)
• FITC-PEG-COOH(熒光素-聚乙二醇-羧基)
• Biotin-PEG-NH?(生物素-聚乙二醇-氨基)
• Biotin-PEG-COOH(生物素-聚乙二醇-羧基)
• NHS-PEG-NHS(雙活性酯-聚乙二醇)(CAS: 122375-06-8)
• Biotin-PEG-Biotin(雙生物素-聚乙二醇)
• FITC-PEG-Biotin(熒光素-聚乙二醇-生物素)
• 鏈霉親和素(Streptavidin)(CAS: 9013-20-1)
◆ 聲明
溫馨提示:本試劑僅面向科研場(chǎng)景,由西安凱新生物有限公司YNN匯編整理。
免責(zé)聲明