摘要

在無(wú)菌藥品包裝系統(tǒng)的質(zhì)量控制中，密封完整性是確保藥品無(wú)菌安全的重要指標(biāo)。微生物挑戰(zhàn)法作為一種通過微生物侵入驗(yàn)證包裝系統(tǒng)完整性的檢測(cè)手段，在制藥行業(yè)應(yīng)用時(shí)間較長(zhǎng)。2024年國(guó)家藥典委員會(huì)發(fā)布的《9628 無(wú)菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則（第二次）》中，對(duì)侵沒式微生物挑戰(zhàn)法的試驗(yàn)方法、條件及驗(yàn)證要求進(jìn)行了系統(tǒng)性說明。本文結(jié)合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求，對(duì)微生物挑戰(zhàn)法密封性檢測(cè)的試驗(yàn)原理、實(shí)施流程及關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行介紹，并結(jié)合三泉中石MFY-HS微生物挑戰(zhàn)法密封儀的應(yīng)用特點(diǎn)，闡述其在藥品包裝密封性研究中的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

關(guān)鍵詞

微生物挑戰(zhàn)法密封儀；包裝密封完整性；無(wú)菌藥品包裝系統(tǒng)；9628指導(dǎo)原則；三泉中石MFY-HS

試驗(yàn)意義

無(wú)菌藥品在生產(chǎn)、運(yùn)輸及儲(chǔ)存過程中需要依賴包裝系統(tǒng)維持其無(wú)菌狀態(tài)。一旦包裝密封結(jié)構(gòu)存在微小泄漏，外界微生物便可能通過泄漏路徑進(jìn)入包裝內(nèi)部，從而影響藥品質(zhì)量甚至安全性。

在《9628 無(wú)菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則（第二次）》中，密封完整性檢測(cè)被明確為保障無(wú)菌藥品質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。其中附錄7提出了侵沒式微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)方法，通過模擬微生物在壓差環(huán)境下進(jìn)入包裝內(nèi)部的過程，對(duì)包裝系統(tǒng)的密封性能進(jìn)行驗(yàn)證。該方法能夠直接反映微生物侵入風(fēng)險(xiǎn)，因此在藥品包裝密封性研究與驗(yàn)證中具有重要意義。

試驗(yàn)設(shè)備

微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)可采用三泉中石研發(fā)的 MFY-HS微生物挑戰(zhàn)法密封儀 完成。該設(shè)備可在試驗(yàn)過程中提供穩(wěn)定的負(fù)壓與正壓環(huán)境，用于模擬運(yùn)輸、儲(chǔ)存等過程中可能出現(xiàn)的壓力變化條件。

MFY-HS可實(shí)現(xiàn)抽真空與加壓兩種測(cè)試模式，并通過專用固定裝置對(duì)試驗(yàn)樣品進(jìn)行穩(wěn)定固定。例如在預(yù)灌封注射器試驗(yàn)中，可固定其可移動(dòng)部件；在柔性包裝試驗(yàn)中，可限制包裝膨脹變形，以保持密封結(jié)構(gòu)受力條件的一致性。

試驗(yàn)依據(jù)

微生物挑戰(zhàn)法相關(guān)試驗(yàn)可參考以下標(biāo)準(zhǔn)或技術(shù)文件：

• 《9628 無(wú)菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則（第二次）》

• USP<1207.2>包裝完整性評(píng)價(jià)

• ASTM D6653 / ASTM D6653M 包裝運(yùn)輸壓力差模擬試驗(yàn)方法

這些標(biāo)準(zhǔn)對(duì)試驗(yàn)菌種選擇、培養(yǎng)基使用、壓力條件、試驗(yàn)時(shí)間以及結(jié)果判定等方面均提出了技術(shù)要求。

試驗(yàn)原理

微生物挑戰(zhàn)法（侵沒式）是通過將試驗(yàn)樣品浸沒在含有微生物的培養(yǎng)基中，并在一定的壓力差條件下觀察微生物是否進(jìn)入包裝內(nèi)部，從而判斷包裝系統(tǒng)密封性能的一種方法。

在試驗(yàn)過程中：

1. 將樣品浸入含微生物的培養(yǎng)基中。

2. 通過設(shè)備產(chǎn)生真空或正壓，使包裝內(nèi)外形成壓差。

3. 壓差作用下若包裝存在泄漏通道，培養(yǎng)基中的微生物可能進(jìn)入包裝內(nèi)部。

4. 試驗(yàn)結(jié)束后通過培養(yǎng)觀察是否出現(xiàn)微生物生長(zhǎng)，從而判定是否發(fā)生泄漏。

壓力差的作用不僅能夠模擬運(yùn)輸過程中的環(huán)境變化，還可以幫助排除殘留空氣，使培養(yǎng)基更容易接觸潛在泄漏通道。

適用范圍

侵沒式微生物挑戰(zhàn)法適用于多種藥品及醫(yī)療器械包裝結(jié)構(gòu)，例如：

• 輸液軟袋等柔性包裝

• 泡罩包裝

• 預(yù)灌封注射器

• 口服固體藥瓶

• 口服液體瓶

• 注射劑瓶

• 塑料瓶與軟管包裝

需要注意的是，包裝材料必須能夠耐受培養(yǎng)基浸泡及試驗(yàn)壓力條件，且試驗(yàn)過程中包裝結(jié)構(gòu)不應(yīng)發(fā)生改變。

取樣準(zhǔn)備

試驗(yàn)前需對(duì)樣品進(jìn)行規(guī)范準(zhǔn)備，主要包括以下步驟：

1. 樣品選擇
   選取具有代表性的完整包裝樣品。

2. 外觀檢查
   確保樣品無(wú)明顯破損或外觀缺陷。

3. 樣品固定
   對(duì)柔性包裝或具有活動(dòng)部件的包裝，利用專用固定裝置限制其膨脹或移動(dòng)。

4. 培養(yǎng)基準(zhǔn)備
   根據(jù)試驗(yàn)要求配置含目標(biāo)微生物的培養(yǎng)基。

5. 設(shè)備參數(shù)設(shè)置
   根據(jù)試驗(yàn)方案設(shè)置真空度、壓力值、保持時(shí)間等參數(shù)。

試驗(yàn)過程

1. 將試驗(yàn)樣品安裝在微生物挑戰(zhàn)法密封儀的試驗(yàn)腔內(nèi)，并進(jìn)行固定。

2. 在試驗(yàn)腔中加入含微生物的培養(yǎng)基，使樣品浸沒。

3. 設(shè)置試驗(yàn)壓力條件，例如負(fù)壓或正壓循環(huán)。

4. 啟動(dòng)設(shè)備，設(shè)備自動(dòng)完成抽真空、保壓及壓力變化過程。

5. 在設(shè)定時(shí)間內(nèi)保持壓差條件，使培養(yǎng)基充分接觸潛在泄漏點(diǎn)。

6. 試驗(yàn)結(jié)束后取出樣品并進(jìn)行培養(yǎng)觀察。

7. 根據(jù)是否出現(xiàn)微生物生長(zhǎng)判斷包裝系統(tǒng)是否存在泄漏。

在部分研究中，還可結(jié)合統(tǒng)計(jì)方法分析不同孔徑下微生物侵入概率，從而評(píng)估包裝系統(tǒng)的最大允許泄漏限度。

設(shè)備優(yōu)勢(shì)

三泉中石 MFY-HS微生物挑戰(zhàn)法密封儀 在藥品包裝密封性研究中具有以下特點(diǎn)：

• 設(shè)備支持正壓與負(fù)壓兩種試驗(yàn)?zāi)Ｊ?/p>

• 具備自動(dòng)恒壓補(bǔ)氣功能，保證壓力穩(wěn)定

• 試驗(yàn)曲線可實(shí)時(shí)顯示，便于觀察測(cè)試過程

• 多配方存儲(chǔ)功能，方便不同試驗(yàn)條件調(diào)用

• 數(shù)據(jù)自動(dòng)存儲(chǔ)并具備掉電記憶功能

• 支持RS232接口，可連接實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)（LIMS）

• 軟件支持在線升級(jí)，便于系統(tǒng)維護(hù)與功能擴(kuò)展

• 數(shù)據(jù)管理符合GMP對(duì)可追溯性的要求

結(jié)論

微生物挑戰(zhàn)法能夠通過微生物侵入驗(yàn)證包裝系統(tǒng)密封完整性，是無(wú)菌藥品包裝研究中的重要檢測(cè)手段?！?628 無(wú)菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則（第二次）》對(duì)該方法的試驗(yàn)流程及驗(yàn)證要求進(jìn)行了詳細(xì)規(guī)定，為制藥企業(yè)開展密封完整性研究提供了技術(shù)依據(jù)。

在實(shí)際應(yīng)用中，通過三泉中石MFY-HS微生物挑戰(zhàn)法密封儀可實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的壓差環(huán)境控制，并配合專用固定裝置滿足不同包裝結(jié)構(gòu)的試驗(yàn)需求。同時(shí)，結(jié)合真空衰減法等其他檢測(cè)技術(shù)開展對(duì)比研究，可進(jìn)一步確定包裝系統(tǒng)的最大允許泄漏限度，為藥品包裝安全性評(píng)估提供可靠數(shù)據(jù)支持。