2025年1月8日中南大學(xué)湘雅藥學(xué)院丁勁松研究團(tuán)隊(duì)發(fā)表在《AAPS PharmSciTech》上題為“Mechanistic Insights Underlying the Drug Release and Skin Permeation of Guanfacine Transdermal Patch with Various Acrylic Pressure?Sensitive Adhesives”的研究論文。聚焦丙烯酸類壓敏膠（PSAs）的官能團(tuán)對(duì)模型藥物胍法辛（GFC）體外釋放和透皮滲透特性的影響，通過(guò)多種表征技術(shù)系統(tǒng)探究藥物-PSA相互作用、PSA分子流動(dòng)性及皮膚粘附性的作用機(jī)制，為GFC透皮貼劑的研發(fā)及透皮給藥系統(tǒng)（TDDS）的處方設(shè)計(jì)提供參考。

摘要

丙烯酸類壓敏膠（PSAs）廣泛應(yīng)用于透皮給藥系統(tǒng)（TDDS），但PSAs官能團(tuán)影響藥物釋放和透皮滲透特性的分子機(jī)制尚未明確。本研究探討了丙烯酸類PSAs的官能團(tuán)對(duì)模型藥物胍法辛（GFC）體外釋放和透皮滲透特性的影響，藥物釋放和滲透速率順序?yàn)椋毫u基型PSA（PSA-OH）> 無(wú)官能團(tuán)型PSA（PSA-None）> 羧基型PSA（PSA-COOH）。采用熱分析、分子模擬、拉曼光譜和傅里葉變換紅外光譜（FTIR）表征藥物-PSA相互作用，發(fā)現(xiàn)GFC與PSA-None的相互作用力可忽略不計(jì)，GFC的伯氨基與PSA-OH的羥基形成中等強(qiáng)度氫鍵，與PSA-COOH的羧基形成強(qiáng)離子鍵。與PSA-None相比，PSA-OH的機(jī)械強(qiáng)度更弱、流變相移角（δ）更高、玻璃化轉(zhuǎn)變溫度（T?）更低，分子流動(dòng)性更優(yōu)；同時(shí)，PSA-OH具有更高的粘性、粘度和極性，皮膚粘附性更佳。綜上，藥物釋放和滲透由相互作用強(qiáng)度、分子流動(dòng)性和皮膚粘附性共同決定。該研究拓展了對(duì)藥物-PSA-皮膚相互作用分子機(jī)制的理解，為GFC透皮貼劑的開發(fā)提供了參考。

關(guān)鍵詞：膠載藥貼劑；胍法辛；分子間相互作用；分子流動(dòng)性；壓敏膠

實(shí)驗(yàn)材料與儀器

材料

藥物：胍法辛（GFC，純度>99.9%，實(shí)驗(yàn)室合成）

壓敏膠：DURO-TAK® 87–4098、DURO-TAK® 87–2516、DURO-TAK® 87–2054

輔料與耗材：Scotchpak™ 9709釋放襯墊、Scotchpak™ 9738背襯膜；聚醚砜人工膜；二甲基亞砜（DMSO）、磷酸溶液、乙腈等試劑級(jí)化學(xué)品

生物材料：巴馬小型豬離體皮膚

其他：0.9%（w/w）NaCl溶液、0.25%（v/v）硫酸慶大霉素溶液

儀器

制備儀器：涂層設(shè)備、干燥箱、層壓機(jī)、不銹鋼模具

釋放與滲透測(cè)試儀器：垂直Franz擴(kuò)散池、ASCH VAPOSCAN經(jīng)皮水分流失測(cè)量?jī)x、冷凍研磨機(jī)

TK-12D型Franz擴(kuò)散池

分析儀器：高效液相色譜儀、差示掃描量熱儀、拉曼成像顯微鏡、傅里葉變換紅外光譜儀

表征儀器：質(zhì)構(gòu)儀、流變儀、滾動(dòng)球粘性測(cè)試儀、環(huán)形粘性測(cè)試儀、寬帶介電譜儀

實(shí)驗(yàn)過(guò)程

透皮貼劑的制備

采用溶劑蒸發(fā)法制備空白貼劑和GFC載藥貼劑。載藥貼劑組成為97%（w/w）PSA和3%（w/w）GFC，空白貼劑僅含對(duì)應(yīng)PSA。

體外藥物釋放研究

使用垂直Franz擴(kuò)散池進(jìn)行體外釋放實(shí)驗(yàn)，以12.0 mL 0.9%（w/w）NaCl溶液為接收介質(zhì)（模擬皮膚生理環(huán)境，滿足漏槽條件）。將1.54 cm2的GFC透皮貼劑貼于聚醚砜人工膜上表面，人工膜下表面朝向接收介質(zhì)，每組4個(gè)貼劑，共12個(gè)樣本。介質(zhì)溫度維持在32℃±0.5℃，攪拌速度600 rpm，有效擴(kuò)散面積1.54 cm2。分別在1、2、4、6、8、10、12、16、24、36、48、60、72小時(shí)取樣12.0 mL，同時(shí)等溫補(bǔ)充等量新鮮介質(zhì)。

體外皮膚滲透研究

選用1月齡巴馬小型豬背部離體皮膚（生理結(jié)構(gòu)與人類皮膚高度相似），沖切為直徑28.0 mm（面積約6.2 cm2）的圓形片，通過(guò)透皮水分流失儀篩選TEWL值<20.0 g/h/m2的皮膚以確保完整性，每組6個(gè)皮膚樣本，共18個(gè)樣本。實(shí)驗(yàn)條件與體外釋放研究一致，僅在接收介質(zhì)中添加0.25%（v/v）硫酸慶大霉素溶液防止皮膚，并維持72小時(shí)內(nèi)皮膚TEWL值<20.0 g/h/m2（使用ASCH VAPOSCAN經(jīng)皮水分流失測(cè)量?jī)x檢測(cè)）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，切割有效滲透區(qū)域皮膚，復(fù)測(cè)TEWL值，冷凍研磨后用甲醇提取，超聲、離心后取上清液用于含量測(cè)定。ASCH VAPOSCAN經(jīng)皮水分流失測(cè)量?jī)x

圖 2a 甘珀酸（GFC）在壓敏膠（PSA）中的藥物釋放曲線（n=4，均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)差）

b 藥物經(jīng)離體豬皮的經(jīng)皮水分累積滲透量

c 含不同官能團(tuán)壓敏膠的透皮貼劑的皮膚藥物滯留量

d 各時(shí)間點(diǎn)藥物滲透百分率與釋放百分率的比值

樣品分析與釋放模型擬合

采用高效液相色譜儀（HPLC）分析樣品，通過(guò)外標(biāo)法以峰面積定量藥物濃度，計(jì)算累積藥物釋放量、透皮滲透量和皮膚滯留量。采用Origin Pro 2024軟件的Analysis-Fitting模塊，分別用零級(jí)動(dòng)力學(xué)模型、一級(jí)動(dòng)力學(xué)模型和Higuchi模型擬合釋放曲線，以相關(guān)系數(shù)（r2）確定擬合模型。通過(guò)計(jì)算滲透百分比與釋放百分比的比值（F?/R）判斷透皮給藥的限速步驟。

藥物與PSAs分子間相互作用表征

• 熱分析：采用差示掃描量熱儀（DSC）測(cè)定空白及載藥PSA的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度（T?），樣品用量10-15 mg，氮?dú)夥諊魉?/span>20 mL·min?1），溫度從-70℃升至10℃，升溫速率2℃·min?1，以T?變化量化藥物-PSA相互作用強(qiáng)度。

• 分子模擬：利用Materials Studio Version 2024軟件，采用COMPASS II力場(chǎng)，通過(guò)Forcite模塊優(yōu)化GFC和PSA單分子結(jié)構(gòu)，Amorphous Cell模塊構(gòu)建GFC-PSA體系，在305.15 K（32℃）、101.325 kPa下進(jìn)行300 ps分子動(dòng)力學(xué)模擬，計(jì)算相互作用能（E???）、均方根位移（MSD）、內(nèi)聚能密度（CED）和擴(kuò)散系數(shù)（D）。

• 拉曼光譜：將空白及載藥PSA膜樣品固定在拉曼成像顯微鏡上，50倍放大倍數(shù)，532 nm激光源（功率20 mW），掃描波數(shù)范圍4000-200 cm?1，采集時(shí)間1 s，平行測(cè)定3次取平均光譜，經(jīng)基線校正處理。

• FTIR光譜：采用KBr壓片涂層法，將藥物、空白PSA或載藥PSA溶于乙酸乙酯，脫氣后滴涂于KBr壓片表面，50℃干燥15分鐘，以空白KBr壓片為背景，掃描波數(shù)范圍4000-400 cm?1，分辨率2 cm?1，每個(gè)樣品測(cè)試50次取平均光譜。

 PSA分子流動(dòng)性表征

• 機(jī)械強(qiáng)度測(cè)試：使用質(zhì)構(gòu)儀，圓柱形不銹鋼探針（直徑4.60 mm，橫截面積16.62 mm2），測(cè)試速度0.01 mm/s，返回速度0.02 mm/s，施加力2.0 gf；采用流變儀（25 mm平行板）進(jìn)行蠕變-恢復(fù)實(shí)驗(yàn)，32℃下施加400 Pa應(yīng)力維持150 s，隨后撤去應(yīng)力監(jiān)測(cè)150 s內(nèi)的應(yīng)變恢復(fù)情況。

• 流變學(xué)測(cè)試：采用流變儀（25 mm平行板），測(cè)試樣本為干燥膠層（直徑25 mm，厚度400 μm），32℃下通過(guò)振蕩模式的振幅掃描確定線性粘彈區(qū)（LVR），在1000 Pa應(yīng)力、1.0 Hz頻率下進(jìn)行頻率掃描，測(cè)定儲(chǔ)能模量（G'）、損耗模量（G''）和相移角（δ），計(jì)算tanδ（G''/G'）。

PSA粘附性表征

• 粘性測(cè)試：將貼劑粘于30°傾斜板上，標(biāo)準(zhǔn)鋼球從刻度0 mm處釋放，記錄5秒內(nèi)可粘附的鋼球編號(hào)；環(huán)形粘性測(cè)試將貼劑切為2.4 cm×10.0 cm的矩形，短邊粘合形成環(huán)，置于環(huán)形粘性測(cè)試儀夾具中，測(cè)試速度100.0 mm/min，測(cè)試距離35.0 mm，記錄環(huán)形粘性值。

• 粘度測(cè)試：采用流變儀，32℃下以流動(dòng)斜坡模式進(jìn)行粘度曲線掃描，剪切速率從100.0/s降至0.01/s，持續(xù)60 s。

• 極性測(cè)試：將膜樣品雙面磁控濺射鍍金180 s，置于圓形銅電極間，采用寬帶介電譜儀在1 V交流電壓、10?2-10? Hz頻率范圍內(nèi)測(cè)試，32℃下記錄ε?和介電損耗角正切tanδ的對(duì)數(shù)圖譜。

統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（SD）表示，采用Origin Pro 2024軟件進(jìn)行方差分析（ANOVA），以p<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

本研究探究了丙烯酸類PSAs不同官能團(tuán)對(duì)GFC釋放和透皮滲透特性的影響，系統(tǒng)表征了GFC-PSA相互作用的強(qiáng)度和位點(diǎn)：GFC與PSA-None之間幾乎無(wú)相互作用，與PSA-OH的羥基形成中等強(qiáng)度氫鍵，與PSA-COOH的羧基通過(guò)離子相互作用形成羧酸銨鹽，對(duì)GFC釋放具有控制作用。體外釋放和皮膚滲透速率表現(xiàn)為PSA-OH > PSA-None > PSA-COOH，盡管GFC與PSA-OH的相互作用力強(qiáng)于PSA-None，但PSA-OH具有更優(yōu)的分子流動(dòng)性（更低的T?、更高的相移角δ）和更佳的皮膚粘附性（更高的粘性、粘度和極性），從而促進(jìn)藥物釋放和滲透。綜上，藥物-PSA相互作用強(qiáng)度、PSA分子流動(dòng)性和PSA-皮膚粘附性共同決定了透皮貼劑中GFC的釋放和皮膚滲透行為。該研究為PSAs的合理選擇和TDDS的處方設(shè)計(jì)提供了理論支持和技術(shù)指導(dǎo)，也為GFC透皮貼劑的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)，助力該藥物從口服給藥向透皮給藥轉(zhuǎn)化。