【摘要】：目的：應(yīng)用冷原子吸收法檢測硫柳汞含量。方法：將硫柳汞消化還原成汞蒸汽,經(jīng)測汞儀檢測。結(jié)果　用該方法制備標(biāo)準(zhǔn)曲線具有很好的相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)r （n=10） 為019997±0.0002。樣品重復(fù)檢測10次,平均變異系數(shù)為1.03 % ,回收率為96.0%。與雙硫腙滴定法檢測結(jié)果進(jìn)行比較,差異無顯著意義。結(jié)論：此法可作為硫柳汞含量檢測的常規(guī)方法。
【關(guān)鍵詞】：冷原子吸收法;硫柳汞;流感病毒裂解疫苗
生物制品中常規(guī)硫柳汞檢測方法是雙硫腙滴定法。本實(shí)驗(yàn)以冷原子吸收法（測汞儀）對流感病毒裂解（流感）疫苗中的硫柳汞含量進(jìn)行檢測,獲得了比較滿意的結(jié)果,現(xiàn)報(bào)告如下。
材料與方法
1. 材料
1.1 　標(biāo)準(zhǔn)汞溶液:精密稱取干燥至恒重的氯化高汞（分析純）0.1354g,于100ml容量瓶,加純化水至刻度,即為1.0mg/ml標(biāo)準(zhǔn)汞儲備液。取1.0 ml儲備液稀釋100 倍,即為10μg/ml標(biāo)準(zhǔn)汞溶液。臨用前,取10μg/ml標(biāo)準(zhǔn)汞溶液1.0ml,稀釋至100ml,即為0.1μg/ml標(biāo)準(zhǔn)汞溶液。
1.2 　30%氯化亞錫:取氯化亞錫30g ,加至25ml濃鹽酸中,加溫使其*溶解后,用純化水稀釋至100ml。
1.3 　待檢樣品:上海生物制品研究所生產(chǎn)的流感疫苗。
1.4 　回收試驗(yàn)樣品:取干燥至恒重的硫柳汞,
溶于未加硫柳汞的流感疫苗原液中。
1.5 　冷原子吸收法測汞儀:上海華光儀器儀表廠產(chǎn)品。
2. 方法
2.1 　樣品處理:取硫柳汞含量為50μg 的樣品1ml,置具塞消化管中,加濃硫酸2ml,1∶1 硝酸0.5ml,搖勻,置沸水浴消化2h至溶液澄清,冷卻后,稀釋至250ml。
2.2 　冷原子吸收法測定: 取處理好的樣品0.5ml,置翻泡還原瓶中,加5ml純化水,30%氯化亞錫還原劑2ml,立即用測汞儀測定。
2.3 　標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:精密吸取0.1μgPml 標(biāo)準(zhǔn)汞溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml ,置翻泡還原瓶中,其余操作同樣品,計(jì)算公式為:樣品硫柳汞含量%（g/ml）=測得樣品硫柳汞μg 數(shù)×樣品稀釋倍數(shù)×2.017（汞換算至硫柳汞的常數(shù)）×0.000001×100%所用純化水均不應(yīng)含汞。
結(jié)　　果
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線及重復(fù)性
按照上述方法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,各點(diǎn)重復(fù)檢測10次,結(jié)果平均相關(guān)系數(shù)r 為0.9997±0.0002。
2. 回收實(shí)驗(yàn)
取未加硫柳汞的流感疫苗,定量加入硫柳汞,按樣品檢測方法消化、定容,用測汞儀檢測硫柳汞含量,計(jì)算其回收率。
3. 精密性實(shí)驗(yàn)
取3批樣品同時(shí)重復(fù)檢測10次,平均CV值分別為1.02%、1.00%和1.46%,表明實(shí)驗(yàn)內(nèi)重復(fù)性較好。取上述3批樣品在不同時(shí)間重復(fù)檢測3次,平均CV 值分別為0.995 %、1.77 %和2.05%,表明重復(fù)性好。
4. 可靠性試驗(yàn)
取批號為200310001 的流感疫苗,消化后室溫放置,在0、2、4、8、24 h 分別檢測其硫柳汞含量,結(jié)果差異無顯著意義（t=0.2,P>0.05）。
5 兩種方法檢測樣品的結(jié)果比較
用冷原子吸收法和雙硫腙滴定法同時(shí)檢測10批流感疫苗,兩種方法檢測結(jié)果的差異無顯著意義（P>0.05）。
討　　論
用冷原子吸收法檢測硫柳汞含量,具有操作簡便、快速的優(yōu)點(diǎn)。該方法繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線具有很好的相關(guān)性,用該法一次檢測3批樣品10次,平均變異系數(shù)1.03% ,表現(xiàn)了很好的重復(fù)性和穩(wěn)定性。平均回收率為96.0%,與雙硫腙滴定法檢測結(jié)果比較差異無顯著意義。雙硫腙滴定法是化學(xué)萃取法,手工操作較為繁瑣,人為影響因素較多。比較而言,冷原子吸收法檢測硫柳汞無毒害,而且準(zhǔn)確可靠,建議能在生物制品行業(yè)中推廣,作為硫柳汞含量檢測的常規(guī)方法。
參　考　文　獻(xiàn)
[1] 中國生物制品規(guī)程,2000.678～679.
[2] 雷殿良. 檢定方法的驗(yàn)證.國外生物制品管理和標(biāo)準(zhǔn)（續(xù)Ⅲ）.2000.67～75.
[3] 中華人民共和國藥典（二部）.2000.191～193.