液相色譜HPLC 在分析研究和質(zhì)量控制實驗室中占有重要地位。與制造過程和研究結(jié)果發(fā)表有關(guān)的重要決定是基于 HPLC 系統(tǒng)生成的數(shù)據(jù)具有高度可靠性的情況下才能做出的決定。因為HPLC 是一個多組分系統(tǒng)，因此分析結(jié)果的準確性和可靠性取決于每個組分的性能水平。恒譜生本文介紹了一些有助于提高結(jié)果真實性的建議。

        流動相

       流動相的主要作用是將注入的樣品運送到色譜柱，在色譜柱中分離后將各個組分轉(zhuǎn)移到檢測器進行識別和定量。流動相應(yīng)在分析和HPLC開始前新鮮制備，并且溶劑不能含任何懸浮顆粒。使用溶劑進樣口過濾器對溶劑進行過濾，避免雜質(zhì)進入系統(tǒng)。恒譜生建議進一步使用恒譜生在線過濾器或保護柱安裝在色譜柱前后能有效預(yù)防系統(tǒng)內(nèi)產(chǎn)生的顆粒物污染柱子。

       流動相溶劑應(yīng)該彼此*混溶，并且注入的樣品也應(yīng)該混溶。使用緩沖液作為流動相組件時，切勿讓緩沖液在系統(tǒng)內(nèi)部變干，因為干燥時形成的鹽會沉積并阻礙流動相的自由流動以及泵組件的損壞。

        樣品

         大體積進樣會導(dǎo)致峰形失真，也會使色譜柱過載。分析實驗前需要檢查樣品與流動相的兼容性。如果溶解度較低，請嘗試使用與流動相混合物極性相匹配的溶劑或溶劑組合。

       柱子

        色譜柱是 HPLC 系統(tǒng)的關(guān)鍵部件。它的正確保養(yǎng)和使用將大大有助于提供高可靠性的結(jié)果。操作流速和壓力應(yīng)該逐漸改變，這樣這些變化就不會干擾固定相填料。使用恒譜生保護柱還可以防止雜質(zhì)進入主柱。由于流動相的流量取決于溫度，因此強烈建議使用柱溫箱以保持恒定的柱溫以保持流速的一致性。

         泵

        在梯度分析的情況下，需要一個泵來根據(jù)軟件程序保持流動相的組成。通過防止損壞泵部件并在發(fā)現(xiàn)任何可見損壞時及時更換此類部件來實現(xiàn)此類條件。視情況允許沖洗中等極性溶劑或純水，逐漸沖洗泵。

        光源

        大多數(shù) HPLC 分析可以使用 UV 光源進行。這種光源具有使用壽命。根據(jù)供應(yīng)商的建議更換燈將有助于提高吸光度值的重現(xiàn)性。

        探測器

        檢測器是 HPLC 系統(tǒng)的最終組成部分，可確認不同樣品成分的存在并有助于對其進行量化。恒譜生建議定期離線清潔檢測器，并在重新使用之前用水和流動相沖洗。切勿超過工作壓力范圍，以防止可能損壞檢測器單元壁。

        恒譜生提供的建議會有助于提高結(jié)果的質(zhì)量和準確性，儀器的定期清洗和校準，檢查儀器是否正常使用也是非常重要的。儀器昂貴，需要細心使用，一些日常的檢查和清洗過程能夠有助于延長儀器使用壽命。