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產(chǎn)地	國產(chǎn)	級別	其他
證書	其他

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱	小鼠骨髓瘤細(xì)胞
細(xì)胞別稱	P3/ag; P3; ag; P3-ag
細(xì)胞貨號	SNL-145
細(xì)胞種屬	小鼠
生長情況	半貼壁
培養(yǎng)條件	IMDM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境	air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期	2-3天
培養(yǎng)基體積	T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
傳代比例	1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定）
傳代方法	1.輕輕吸走培養(yǎng)上清，留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面吹下細(xì)胞； 2.混勻細(xì)胞，收集細(xì)胞培養(yǎng)基，900rpm離心3-5min，棄上清； 3.加新的培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里； 4.補(bǔ)足培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；
注意事項	半貼壁細(xì)胞會附著瓶底，但貼壁不緊，輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面就會脫落，不需要胰酶消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng)，更適合吹打細(xì)胞操作，吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方	92%FBS+8%DMSO(新手)或92%培養(yǎng)基+8%DMSO(高手*);
凍存規(guī)格	200-300萬/ml，1ml每管
凍存方法	1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞； 2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管； 3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實(shí)驗室，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項	凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實(shí)驗方案

Tips：
1.細(xì)胞半貼壁圓形生長，部分懸浮圓形，傳代時均可收集培養(yǎng)，換液時將懸浮細(xì)胞離心收集后重新接回原瓶，若貼壁細(xì)胞較多活性較好時可以不要懸浮的細(xì)胞；
2.傳代有部分細(xì)胞碎片可以換液后用PBS潤洗細(xì)胞清除，使用的PBS需要恢復(fù)到室溫，加入時不要沖到細(xì)胞面，潤洗盡量輕柔；
3.該細(xì)胞生長較快，培養(yǎng)基消耗較快，培養(yǎng)時注意密切關(guān)注細(xì)胞狀態(tài)，密度較高、培養(yǎng)基有變黃趨勢時及時換液避免細(xì)胞狀態(tài)變差；

我們*使用尚恩生物P3/ag（小鼠骨髓瘤細(xì)胞）**培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-145）作為體外培養(yǎng)P3/ag（小鼠骨髓瘤細(xì)胞）的培養(yǎng)基。