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移動(dòng)方艙P(yáng)CR實(shí)驗(yàn)室核酸操作流程

發(fā)布時(shí)間:2022-5-24
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我們根據(jù)移動(dòng)方艙P(yáng)CR實(shí)驗(yàn)室核酸操作流程來(lái)了解一下PCR實(shí)驗(yàn)室的各個(gè)區(qū)域的具體作用。


試劑準(zhǔn)備區(qū)操作流程:

情況一:

1、試劑盒取出后室溫解凍。

2、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照,傳遞至標(biāo)本制備區(qū)。

情況二:

1、試劑盒取出后室溫解凍。

2、瞬時(shí)離心,渦旋混勻,瞬時(shí)離心。

3、根據(jù)標(biāo)本量,參照說(shuō)明書(shū)配制要求,配制反應(yīng)液。

4、渦旋混勻,瞬時(shí)離心,分裝至八連管內(nèi),加蓋。

5、傳遞至標(biāo)本制備區(qū)。


標(biāo)本制備區(qū)操作流程:

1、生物安全柜內(nèi):采樣管開(kāi)蓋加樣。標(biāo)本管擰緊管帽后,充分震蕩混勻,瞬時(shí)離心;吸取標(biāo)本至核酸提取板對(duì)應(yīng)孔內(nèi)。弱陽(yáng)性質(zhì)控、陰性質(zhì)控,加入核酸提取板對(duì)應(yīng)孔內(nèi)。

2、核酸提取儀:提取核酸。

3、生物安全柜內(nèi):加核酸樣本。取出核酸提取板,從對(duì)應(yīng)的孔內(nèi)吸取核酸樣本;先吸取樣本和陰性質(zhì)控的核酸樣本加入到反應(yīng)液內(nèi),加蓋,蓋緊;然后吸取弱陽(yáng)性質(zhì)控的核酸樣本加入到反應(yīng)液內(nèi),加蓋,蓋緊。

4、蓋緊八連管后,輕震混勻,瞬時(shí)離心,傳遞至擴(kuò)增分析區(qū)。


擴(kuò)增分析區(qū)操作流程:

1、熒光PCR儀:開(kāi)機(jī)、預(yù)熱、核對(duì)擴(kuò)增程序

2、確認(rèn)待擴(kuò)增八連管:管蓋扣緊、管內(nèi)液面高度-致、管內(nèi)無(wú)氣泡。

3、上機(jī)擴(kuò)增:八連管按照標(biāo)號(hào)與PCR儀器設(shè)置編號(hào)-致,擺放,擴(kuò)增。

4、判斷結(jié)果:按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行結(jié)果判讀。


各個(gè)區(qū)域?qū)?shí)驗(yàn)室人員的防護(hù)要求是不一樣的。試劑準(zhǔn)備區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)二級(jí)防護(hù),標(biāo)本制備區(qū)三級(jí)防護(hù)。

二級(jí)防護(hù)要求:著本區(qū)專用工作服,著本區(qū)專用工作鞋(或鞋套)。

三級(jí)防護(hù)要求:更衣室進(jìn)行三級(jí)防護(hù)穿戴,緩沖區(qū)進(jìn)行三級(jí)防護(hù)脫棄。

從防護(hù)登記要求可以看出移動(dòng)方艙P(yáng)CR實(shí)驗(yàn)室的樣本制備區(qū)是具有較高傳染性的。


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