斑馬魚模型評(píng)價(jià)氧化應(yīng)激【評(píng)價(jià)原理】

斑馬魚的基因與人類基因的相似度達(dá)到87％，與哺乳動(dòng)物對(duì)外源化學(xué)物質(zhì)的防御機(jī)制相當(dāng)，包括酶的誘導(dǎo)和氧化應(yīng)激。當(dāng)生物暴露在環(huán)境污染物中，生物可能會(huì)發(fā)生氧化應(yīng)激，主要表現(xiàn)為活性氧（ROS）產(chǎn)生和消耗的不平衡。在需氧生物的活細(xì)胞中，活性氧被一種由水和脂溶性低分子量自由基清除劑、特異性抗氧化酶組成的抗氧化防御機(jī)制解毒。

應(yīng)用ROS特異性熒光檢測(cè)試劑，它的水解產(chǎn)物能被ROS氧化為高熒光物質(zhì)，用多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)熒光值反映氧化應(yīng)激的程度。本方法已被授予國(guó)家發(fā)明。

斑馬魚模型評(píng)價(jià)氧化應(yīng)激【實(shí)驗(yàn)方案】

我們將受測(cè)試斑馬魚分成三組，分別是底物對(duì)照組、正常對(duì)照和服用供試品組（供試品通過(guò)溶解到養(yǎng)魚用水中攝入到斑馬魚體內(nèi)），并加入ROS特異性熒光檢測(cè)試劑。

服用供試品一段時(shí)間后，我們使用酶標(biāo)儀對(duì)斑馬魚體內(nèi)ROS進(jìn)行熒光定量。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚體內(nèi)ROS熒光值

可以看到，服用供試品組斑馬魚體內(nèi)熒光值比正常對(duì)照組有明顯升高。

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用供試品組的斑馬魚ROS水平明顯高于正常對(duì)照組，與正常對(duì)照組存在顯著性差異。

2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品誘發(fā)斑馬魚氧化應(yīng)激。