利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)酒精性肝損傷保護(hù)作用【評(píng)價(jià)原理】

斑馬魚的基因與人類基因的相似度達(dá)到87％，斑馬魚肝臟中有許多與哺乳動(dòng)物同源的脂質(zhì)代謝酶，與哺乳動(dòng)物對(duì)外源化學(xué)物質(zhì)的防御機(jī)制相當(dāng)，包括酶的誘導(dǎo)和氧化應(yīng)激。而且斑馬魚幼魚通體透明，容易觀察到毒性表型。酒精性肝損傷是*發(fā)病率和死亡率的主要原因，酒精性肝損傷是過量飲酒的結(jié)果。當(dāng)患者繼續(xù)飲酒時(shí)，會(huì)誘發(fā)嚴(yán)重的肝損傷形式，如脂肪性肝炎，纖維化，肝硬化和肝細(xì)胞癌。用乙醇可以誘發(fā)斑馬魚肝臟損傷，模擬人的肝臟疾病。

我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚肝臟毒性有4個(gè)指標(biāo)：1.肝臟面積；2.肝臟變性程度；3. 卵黃囊吸收延遲的發(fā)生率（卵黃囊是脂肪，卵黃囊吸收與肝功能密切相關(guān)）；4. 肝臟病理切片。

利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)酒精性肝損傷保護(hù)作用【實(shí)驗(yàn)方案】

我們將受測(cè)試斑馬魚分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用肝保護(hù)劑組。其中正常對(duì)照組未攝入乙醇，模型對(duì)照組與服用肝保護(hù)劑組都攝入了等量的乙醇（乙醇通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。肝保護(hù)劑組在攝入對(duì)乙醇的同時(shí)攝入美他多辛之類的肝保護(hù)劑。

服用一段時(shí)間肝保護(hù)劑后，我們?cè)陲@微鏡下觀察斑馬魚肝臟及卵黃囊表型，同時(shí)制作成病理切片觀察肝臟的病理結(jié)構(gòu)變化。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚肝臟表型圖

可以看到，模型對(duì)照組組斑馬魚肝臟腫大、變性、卵黃囊吸收延遲，肝保護(hù)劑相對(duì)模型組顯著減少。

圖2. 斑馬魚肝臟病理切片

（紅箭頭：肝細(xì)胞腫大；黑箭頭：脂肪空泡樣變性）

從病理切片中也能看出來(lái)，正常對(duì)照組肝細(xì)胞核規(guī)則清晰，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常，邊緣清晰。乙醇處理后，斑馬魚肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊、肝細(xì)胞核腫大，肝組織出現(xiàn)脂肪空泡樣變性，而肝保護(hù)劑組細(xì)胞和正常斑馬魚中形態(tài)相似。

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，肝保護(hù)劑組斑馬魚肝臟與正常對(duì)照組相似，并未出現(xiàn)模型對(duì)照組的肝臟腫大、肝變性和卵黃囊吸收延遲情況。

2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)美他多辛對(duì)斑馬魚肝臟的保護(hù)作用。