利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)抗血小板聚集性血栓作用【評(píng)價(jià)原理】

花生四烯酸主要為AA在TXA2合成酶作用下生成TXA2，激活血小板，活化血小板通過(guò)GPⅡb／III a受體與纖維蛋白原交聯(lián)在一起形成血栓。斑馬魚(yú)擁有凝血因子、血小板受體，并對(duì)臨床應(yīng)用的抗凝血和抗血栓藥物具有很好的反應(yīng)，適合于血栓形成機(jī)制和治療藥物的評(píng)價(jià)。

軀干出現(xiàn)血栓后，血流速度便會(huì)減慢，回心血量便會(huì)減少。經(jīng)過(guò)紅細(xì)胞特異性染色（呈紅色），患有血小板聚集性血栓的斑馬魚(yú)心臟紅細(xì)胞數(shù)量比正常斑馬魚(yú)明顯減少。由于斑馬魚(yú)血液系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程透明的特點(diǎn)，可以明顯被觀察到?；加醒“寰奂匝ǖ陌唏R魚(yú)血流速度會(huì)明顯比正常斑馬魚(yú)明顯減慢，在血流分析下可以明顯觀察到。

利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)抗血小板聚集性血栓作用【實(shí)驗(yàn)方案】

我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和抗血栓藥物組。其中正常對(duì)照組未攝入花生四烯酸，模型對(duì)照組與服用/注射抗血栓藥物組都攝入了等量的花生四烯酸（花生四烯酸通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中或注射的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi)）?？寡ㄋ幬锝M在攝入花生四烯酸的同時(shí)攝入阿司匹林、氯吡格雷、丹參多酚酸、鹽酸地爾硫卓、血栓通、血塞通之類(lèi)的抗血栓藥物。

服用一段時(shí)間抗血栓藥物后，我們（1）對(duì)斑馬魚(yú)做紅細(xì)胞特異性染色，觀察心臟紅細(xì)胞數(shù)量的變化；（2）觀察血流速度的變化。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚(yú)心臟紅細(xì)胞表型圖

綠色虛線區(qū)域?yàn)樾呐K，心臟內(nèi)紅色為紅細(xì)胞

可以看到，服用抗血栓藥物組的心臟情況與模型對(duì)照組比較，紅細(xì)胞數(shù)量明顯增多。

圖1. 斑馬魚(yú)血流速度

與模型對(duì)照組比較，*** p < 0.001

可以看到，服用抗血栓藥物組的血流情況與模型對(duì)照組比較，血流速度明顯加快。

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用抗血栓藥物組與模型對(duì)照組比較，心臟紅細(xì)胞數(shù)量明顯增加、血流速度明顯加快。

2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了阿司匹林、氯吡格雷、丹參多酚酸、鹽酸地爾硫卓、血栓通和血塞通具有顯著的抗血栓作用。