利用斑馬魚模型評價眼毒性

【評價原理】

斑馬魚胚胎視力發(fā)育迅速，受精后發(fā)育4天的幼魚就已經依賴視覺線索進行捕食和躲避行為。斑馬魚不僅在角膜、晶狀體、脈絡膜、視網膜以及血管化和神經支配等結構上和人類的眼睛有明顯的相似性，而且還有保守的基因表達、細胞構成和組織結構，因此為研究食品及保健品的眼部毒性提供了一個模型。

我們評價斑馬魚眼毒性有4個指標：1.眼睛大?。?.眼部細胞凋亡；3.眼部血管面積；4.眼部病理切片。

【實驗方案】利用斑馬魚模型評價眼毒性

我們將受測試斑馬魚分成兩組，分別是正常對照組和供試品組，供試品組（保健食品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或灌胃的方式攝入到斑馬魚體內）。

服用一段時間眼保護劑后，我們在解剖顯微鏡下觀察眼睛大小；整體做凋亡細胞特異性染色，觀察眼部細胞凋亡；通過熒光顯微鏡觀察眼部血管面積，同時制作成病理切片觀察眼部的病理結構變化。

【結果展示】

圖1. 斑馬魚眼睛表型圖

箭頭指示區(qū)域為眼

可以看到，保健食品組眼睛相較于正常對照組明顯減小。

圖2. 斑馬魚眼細胞凋亡表型圖

黃色虛線區(qū)域為眼，綠色小點為凋亡細胞

可以看到，保健食品組的凋亡細胞較正常對照組明顯增多。

圖3. 斑馬魚眼部血管面積

黃色虛線標記血管面積

可以看到，保健食品組眼睛血管面積相較于正常對照組明顯增加。

圖4. 眼部凋亡細胞病理切片

可以看到，保健食品組出現較多的凋亡細胞，表現為細胞固縮、染色質邊集，視網膜結構異于正常對照組。

【評價結論】

1. 經過每組30尾斑馬魚的對比實驗，保健食品組斑馬魚眼睛明顯變小，凋亡細胞明顯增多，眼部血管面積明顯增多，在病理切片中出現較多的凋亡細胞，表現為細胞固縮、染色質邊集，視網膜結構異常。

2. 本實驗證實了保健食品的眼毒性。