利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)骨毒性

【評(píng)價(jià)原理】

藥物骨毒性的安全性研究與肝、腎、心臟毒性等一般毒性相比較為薄弱，尤其是兒科人群用藥的骨毒性安全問題，骨毒性非臨床安全性評(píng)價(jià)愈加受到重視。斑馬魚是一種與人類同源性較高的脊椎動(dòng)物，和哺乳動(dòng)物一樣，斑馬魚的骨骼是從3種胚胎干細(xì)胞系即神經(jīng)嵴、體節(jié)中胚層和側(cè)板發(fā)育而來的。

斑馬魚骨骼經(jīng)過特異性的熒光染色后，經(jīng)熒光顯微鏡采集到熒光強(qiáng)度能反映出骨密度和脊椎骨的數(shù)量，從而評(píng)價(jià)供試品骨毒性。

【實(shí)驗(yàn)方案】利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)骨毒性

我們將受測(cè)試斑馬魚分成兩組，分別是正常對(duì)照和供試品組（供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。

服用/注射供試品一段時(shí)間后，我們對(duì)斑馬魚整體做骨鈣染色，以脊椎骨熒光強(qiáng)度和脊椎骨數(shù)量評(píng)價(jià)供試品的骨毒性。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚骨密度表型圖

黃色虛線區(qū)域?yàn)橛?jì)算用脊椎骨

可以看到，服用/注射供試品組斑馬魚脊椎骨熒光強(qiáng)度明顯減弱。

圖2. 斑馬魚脊椎骨數(shù)量表型圖

可以看到，服用/注射供試品組斑馬魚脊椎骨數(shù)量明顯減少。

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1. 經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用/注射供試品組的斑馬魚脊椎骨熒光強(qiáng)度明顯減弱、數(shù)量明顯減少，與正常對(duì)照組存在明顯的差別。

2. 本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品對(duì)斑馬魚有骨毒性。