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養(yǎng)細(xì)胞的人怕的就是細(xì)胞污染，細(xì)胞一污染，一夜回到解放前，一切都得從頭開始，尤其是新手小白，幾乎都逃不過細(xì)胞污染，避免細(xì)胞污染，重要的是操作前和操作時。 

1.  操作前，要保證所有的用品無菌，移液槍槍頭、離心管、培養(yǎng)瓶、PBS、培養(yǎng)基、血清等。     高壓滅菌，一般要提前一天高壓滅菌，滅菌結(jié)束后放烘箱烘干，為確保充分烘干，一般需要過夜。要確保一定被高壓過，像我們實驗室就發(fā)生過沒被高壓的槍頭盒放烘箱里了，從高壓鍋里拿瓶子時一定要擰緊瓶蓋，否則就白壓了。 

2.操作前紫外燈照射超凈臺20min左右。實驗前打開超凈臺的通風(fēng)，用酒精棉球?qū)⑴_面擦一遍，所有進入超凈臺的東西都要噴酒精。   

3.操作時，所有的玻璃瓶打開前都需在酒精燈上烤一圈，畢竟“病從口入”嘛，將瓶蓋放在左側(cè)（清潔區(qū)），保證操作時不會從上方經(jīng)過。 

4.操作時注意槍頭，做到懸空加樣，尤其是給非無菌的離心管里加?xùn)|西，給含有細(xì)胞的皿里加?xùn)|西，如你從玻璃瓶里給一個含有細(xì)胞的培養(yǎng)皿里加培養(yǎng)基，那么你的槍頭就不能伸到培養(yǎng)皿的液體里，否則你的培養(yǎng)基就污染了，除非你每次換槍頭。   

5.注意袖口，胳膊，切記不要從打開的瓶，皿上面越過，防止落菌。

6.手拿所有的蓋子時，一定不要碰到里面。

7.實驗結(jié)束后，用酒精燈燒所有的瓶口、蓋子，擰緊，用封口膜封好，我們的封口膜一般是提前剪好泡在含有酒精的瓶子里。     一般細(xì)胞污染分為細(xì)菌、真菌、支原體，支原體在顯微鏡下肉眼看不到，底下圖一為細(xì)菌污染，圖二為真菌-念珠菌污染

 

細(xì)菌污染有時和細(xì)胞碎片不容易區(qū)別，在高倍鏡下都會看到黑色小點在做布朗運動，但是細(xì)胞碎片大小不一，培養(yǎng)基清澈透亮，而細(xì)菌污染的黑點大小差不多，培養(yǎng)基渾濁，有泥沙感。