技術(shù)文章
pcr實驗室小問題大困難,知道就能輕松應(yīng)付
發(fā)布時間:2020-12-16相信做過 PCR 實驗的伙伴,一定有跟我一樣的感受,坑多,且讓人防不勝防!
辛辛苦苦做半天,PCR 做出來還是假陽性......
做完 PCR,蒸發(fā)了一半,開蓋手抖灑了......
PCR 管居然融化變形,蓋打不開了?
而且 PCR 擴增效率ji低......
令人抓狂是好不容易出一次滿意結(jié)果,遲遲不能復(fù)現(xiàn).......「坑」雖多,吐槽完,實驗仍要繼續(xù),如何提前避開才是重中之重。造成這些結(jié)果的原因有很多,模板質(zhì)量不佳、引物、退火溫度不合適等等,但還有一個容易被忽略因素:PCR 耗材,它出問題會導(dǎo)致出現(xiàn)樣品蒸發(fā)、漏液等實驗事故,甚至直接導(dǎo)致實驗失敗。
PCR 反應(yīng)是升降溫循環(huán)反應(yīng),樣品蒸發(fā)的影響不容忽視,對于如XG檢測應(yīng)用的 qPCR 實驗,體系的體積穩(wěn)定性及透光性對檢測的靈敏度也有干擾。雖然高透的管蓋、8 聯(lián)管管蓋起到了一定的保護作用,但密封效果一般,關(guān)蓋與開蓋過程繁瑣、高溫讓蓋子變形等情況,會直接造成漏液、氣溶膠污染等問題,想想就令人頭大......為了盡可能規(guī)避以上問題出現(xiàn),不讓 PCR/qPCR 實驗付之東流,在使用 PCR 板時,自粘膜逐漸成為實驗優(yōu)選。但不同來源的自粘膜的品質(zhì)參差不齊,密封不嚴,透光性不佳,不能適用于小通量也是使用 PCR/qPCR 膜的制約之處。
qPCR 高透膜:用于 PCR 板或者酶標板,幾乎適合所有板型。
高度透明并具有ji小的自體熒光,適用于 qPCR、ELISA 等熒光或顯色分析實
壓力敏感型膜,只有在施加壓力時才具有粘性,因此封閉時反應(yīng)孔上方的膜粘性很小,可有效減少樣品黏附(原理見下圖)

壓力敏感型膜的原理

BRAND 壓敏型高透膜
(貨號 781391)
普通 PCR 膜
用于 PCR 板或者酶標板,幾乎適合所有板型。
透光,適合肉眼或者光學(xué)觀察,適用于 PCR、ELISA、EIA 等顯色分析實驗。
邊條便于拿取,強粘性保證密封效果。

BRAND PCR 膜(貨號 781390)
PCR/儲存膜
用于 PCR、ELISA 或樣品儲存。適合 -80 ℃ 樣品冷藏,耐受 DMSO 與溶透明可用于顯色分析實驗或肉眼觀察??伤洪_重復(fù)使用。
BRAND PCR/儲存膜(貨號 701367)
能夠封住 PCR 板的膜千篇一律,真正耐高溫、蒸發(fā)少、透光好的膜。實驗表明,BRAND 壓力敏感型高透膜可以更有效地密封 PCR 板,減少蒸發(fā)(見下圖)。

使用 BRAND 壓敏型高透膜(781391)與不同 PCR 自粘膜 25 個循環(huán)后的蒸發(fā)率比較實驗,PCR 板為 BRAND 781375。實驗顯示 BRAND 壓敏型高透膜(781391)(左 1)可顯著減少 PCR 反應(yīng)體系的蒸發(fā)。
想要 PCR 實驗不踩「坑」,選對膜很重要,溫馨提示:有了膜可別忘了封膜神器哦!

BRAND 封膜用刮板(貨號 701381)
正所謂:
古今 P-C-R,
貼膜鎖乾坤,
多少實驗事,
都付笑談中…
制藥網(wǎng)
凌源市|
贡觉县|
旺苍县|
霍林郭勒市|
秦安县|
呼玛县|
日照市|
西丰县|
磐安县|
花垣县|
绥德县|
伊金霍洛旗|
万全县|
淮阳县|
章丘市|
富宁县|
曲阳县|
靖边县|
黄平县|
鲁山县|
苏州市|
渭南市|
兴业县|
闵行区|
家居|
嘉峪关市|
象山县|
巴青县|
长丰县|
松桃|
鹤山市|
容城县|
嘉祥县|
博野县|
周口市|
靖边县|
将乐县|
上高县|
宝兴县|
新宾|
沅江市|