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管式離心機在分離大腸桿菌中的應(yīng)用之一
大腸桿菌，是一種直桿狀、棒狀的細菌，它大約長2微米，菌體直徑大約0.25至1微米，算是一種中等大小的桿菌了。它同時還是一種兼性厭氧的細菌，大腸桿菌是目前應(yīng)用較廣的外源基因表達體系，大腸桿菌的遺傳背景和生li特性研究已相當*,已有很多不同抗藥性、不同營養(yǎng)依賴型和不同校正突變型的菌種供選擇應(yīng)用，可以根據(jù)不同的載體而選擇不同的菌種; 其繁殖能力強，培養(yǎng)簡單、操作方便、遺傳穩(wěn)定；大規(guī)模發(fā)酵成本低，具有巨大的生產(chǎn)潛力; 且下游工藝簡單、易于控制。 今天我們簡單介紹一下大腸桿菌在發(fā)酵培養(yǎng)后涉及的菌體分離工藝，即采用離心分離技術(shù)的菌體分離方式。
大腸桿菌發(fā)酵液提取生化物質(zhì)的幾個重要步驟，就是預(yù)處理和固液分離。其目的不僅在于分離大腸桿菌和其他懸浮顆粒，還希望除去部分不可溶性雜質(zhì)和改變發(fā)酵液的性質(zhì)，以利于后續(xù)的從澄清的發(fā)酵液中采用物理、化學的方法提取代謝產(chǎn)物，或?qū)Υ竽c桿菌進行細胞破碎、碎片的分離和提取胞內(nèi)產(chǎn)物。
大腸桿菌發(fā)酵液中雜質(zhì)很多，其中有些雜質(zhì)不僅直接影響產(chǎn)品質(zhì)量和得率，同時對后續(xù)的提取和精制有很大影響，因此，在預(yù)處理時，必須采用適當方法使這些雜質(zhì)沉淀，在固液分離時除去，以利于后面的提取和精制過程能順利進行。用于大腸桿菌發(fā)酵液固液分離的主要是離心分離，我們采用離心機高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力來實現(xiàn)發(fā)酵液的固液分離，具有分離速度快、分離效率高，液相澄清度好等優(yōu)點。