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浙江聯(lián)碩生物科技有限公司
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| 參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地嘉興市
聯(lián)系方式：小豐查看聯(lián)系方式
更新時間：2020-06-18 16:34:28瀏覽次數(shù)：569次
聯(lián)系我時，請告知來自 制藥網(wǎng)| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 規(guī)格 | 100T |
|---|---|---|---|
| 級別 | 其他 |
名稱：CCK-8試劑盒
貨號：AS05048
產(chǎn)品簡介：
CCK-8試劑盒，是一種基于WST-8的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下，可以被還原生成橙黃色水溶性的甲臜（Formazan）。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。
使用方法：
1、在96孔板中接種細(xì)胞懸液(100 ul /孔)，通常細(xì)胞增殖實驗每孔約2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔約5000個細(xì)胞，具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等因素決定)。
2、按照實驗需要，進(jìn)行培養(yǎng)并給予0-10ul特定的藥物刺激，處理一段適當(dāng)?shù)臅r間(例如: 6,12, 24或48小時)。
3、每孔加入10ul CCK-8溶液。如果起始的培養(yǎng)體積為200ul，則需加入20ul CCK-8溶液，以此類推?？梢杂眉酉鄳?yīng)量細(xì)胞培養(yǎng)基和CCK-8但不加細(xì)胞的孔作為空白對照，若擔(dān)心所使用的藥物會干擾檢測，需設(shè)置加相應(yīng)量細(xì)胞培養(yǎng)液、藥物和CCK-8溶液但不加細(xì)胞的孔作為空白對照。
4、在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育1-4小時，具體時間可以通過預(yù)實驗確定。預(yù)實驗時可以在0.5、1、2和4小時后分別用酶標(biāo)儀檢測，然后選取吸光度范圍比較適宜的一個時間點用于后續(xù)實驗。
5、用酶標(biāo)儀測定在450 nm處的吸光值，若無450nm濾光片，可以使用420-480nm的濾光片。如果樣品為高渾濁度的細(xì)胞懸液，可以使用大于600nm的波長，例如650nm，作為參考波長進(jìn)行雙波長測定。
6、如果需要暫時不測定O.D值，可以向每孔中加入10ul 0.1M HCl溶液或者1% w/v的SDS溶液，避光保存在室溫，24小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。
注意事項：
1、使用96 孔板進(jìn)行檢測時，如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長，請注意蒸發(fā)問題?？蓪?/span>96 孔板外圍一圈加培養(yǎng)基、水或PBS 保濕。同時，可以把96 孔板置于培養(yǎng)箱內(nèi)靠近水盤的位置以緩解蒸發(fā)。
2、培養(yǎng)時間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔內(nèi)細(xì)胞數(shù)量的多少而不同。在正式實驗前，建議先做預(yù)實驗摸索鋪板的細(xì)胞數(shù)量以及加入CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時間。
3、鋪板時請注意保證每個孔細(xì)胞數(shù)量均勻，建議鋪板過程中注意時常混勻，防止因細(xì)胞沉淀造成不均勻。加入CCK-8 后請前后左右輕輕晃動培養(yǎng)板數(shù)次，使培養(yǎng)基和CCK-8 溶液充分混勻。
4、本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)，如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性，可在加CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基，去掉藥物的影響。若藥物影響比較小的情況可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。
5、加入CCK-8 時，如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長，培養(yǎng)基顏色或pH 值已變化，建議換用新鮮的培養(yǎng)基。
6、用酶標(biāo)儀檢測前需確保每個孔內(nèi)沒有氣泡，否則會干擾測定。
7、本試劑盒系無菌灌裝生產(chǎn)。在使用過程中，請在生物安全柜內(nèi)無菌操作，避免污染。
8、為了您的健康和安全，請穿著實驗服并戴一次性手套或乳膠手套操作。
保存方法：
0-5℃避光保存，*保存建議-20℃保存，但不能反復(fù)凍融。
0-5℃條件下可保存一年。
主營品牌：Sigma、Amresco、santa、hyclone、PeproTech、ABcam、life、Axygen、Corning、AMEKO、Merck、promega、GE、nunc等
主營產(chǎn)品:
試劑盒：ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)：血清，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基
耗材：進(jìn)口、國產(chǎn)細(xì)胞培養(yǎng)耗材、普通實驗耗材
生化試劑：*生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑
抗體：進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等
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