詳細介紹
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。
| 產(chǎn)品名稱 | |
| 英文名稱 | Bordetella avium PCR |
| 貨號 | YZP3358 |
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
以下是禽波氏桿菌PCR檢測試劑盒說明書的相關(guān)產(chǎn)品:
夫拉扎勃(原:呋咱甲氫龍) 英文名稱:J La Szabo (formerly: furazabol) 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光
吡拉西坦 英文名稱:Laci Staw 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光
豆腐果苷 英文名稱:Helicid 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光
大蒜素 英文名稱:Allicin 規(guī)格::0.5ml 保存::-20℃,避光
紫杉 英文名稱:Paclitaxel 規(guī)格::30mg 保存::-20℃,避光
腎上腺色腙 英文名稱:Carbazochrome 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光
更昔洛韋 英文名稱:Ganciclovir 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光
氨力農(nóng) 英文名稱:An Linong 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光
鈉化 英文名稱:Sodium chloride 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光
鹽酸特拉唑嗪 英文名稱:Terazosin hydrochloride 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光
苯磺酸氨地平 英文名稱:Amlodipine besylate 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光
阿苯達唑 英文名稱:Albendazole 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光
烏苯美司 英文名稱:Ubenimex 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光
維生素B2 英文名稱:Vitamin B2 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光
禽波氏桿菌PCR檢測試劑盒說明書山羊白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA Kit Goat Interleukin-8,IL-8 ELISA Kit
人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)ELISA Kit Human major histocompatibility complex class I chain-related gene A,MICA ELISA Kit
人穿孔素/成孔蛋白(PRF1/PFP)ELISA Kit Human PRF1/PFP ELISA Kit
猴slit同源物2(果蠅)(SLIT2)ELISA Kit Monkey slit homolog 2(Drosophila)(SLIT2)ELISA kit
人G蛋白偶合受體44(GPR44/CRTH2/DL1R)ELISA Kit Human GPR44 ELISA kit
人去乙酰化酶Sirtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)ELISA Kit Human SIRT2/SIR2L/SIR2L2 ELISA Kit
人15-epi-氧脂素 A4(15-epi-LXA4)ELISA Kit Human 15-epi-Lipoxin A4,15-epi-LXA4 ELISA Kit
大鼠骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白ELISA Kit Rat Gremlin ELISA Kit
大鼠丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)ELISA Kit Rat Alanine aminotransferase,ALT ELISA Kit
牛肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA Kit Bovine pulmonary surfactant-associated protein B,SP-B ELISA Kit
牛布魯氏桿菌抗體(IgG)ELISA Kit Bovine Brucella antibody IgG ELISA kit
植物維生素E(VE)ELISA Kit Plant Vitamin E,VE EELISA Kit
山羊抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA Kit Goat antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin,ADH/VP/AVP ELISA Kit
豬粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA Kit Pig Mucin-2,MUC2 ELISA Kit
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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