基因型
F- mcrA 0 (mcrBC-hsdRMS-mr) recA1 endA1 lon gyrA96 thi supE44 relA1 λ 0 (lac-proAB)
簡要說明
Stbl2菌株來源于JM109 E.coli strain,適合克隆不穩(wěn)定插入片段(正向重復序列，逆轉錄病毒序列
等) ; marA 突變和mcrBC- hsdRMS-mrrdeletion使該菌株更適于克隆甲基化的基因組序列;同時Stbl2
也可用于慢病毒載體的構建。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質粒DNA的提
取。不存在lacIZ 0M15,不可用于藍、白斑篩選。AngYuBio High5TM系列Stbl2感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工
藝制作，經(jīng)pUC19檢測轉化效率可達10°cfu/μg DNA。
C
操作說明
1. AngYuBio Stbl2感受態(tài)細胞放置冰中融化( 或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速
插入冰中)，加入目的DNA (質?；蜻B接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42°C水浴熱激45 秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3.向離心管中加入 0.9 mL室溫S.0.C.培養(yǎng)基或LB培養(yǎng)基(*使用s.0.C培養(yǎng)基，提高轉化效率)。

4.30°C, 225 rpm復蘇90分鐘。(當質粒中含有不穩(wěn)定片 段時，30C培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,
若轉化control PUC19計算轉化效率，則需37C, 225 rpm復蘇60分鐘。)
5.5000rpm 離心- - 分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的s.0.C.
或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于30°C培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。 (若轉化control PUC19計算轉化效率，則需37°C培養(yǎng)過
夜) .
注意事項

 1.感受態(tài) 細胞在冰上融化。
2.混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3.轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少終用于涂板的菌量。
4. S.0.C.或LB培養(yǎng)基均可使用，S.0.C.可提高轉化效率20%;實驗人員可選擇在37C或30C培養(yǎng)細胞，
37C條件下，菌生長速度加快，有利于提高質粒產量，30C培養(yǎng)可降低錯誤重組概率。
附: S.0.C. Medium配方
2% Tryptone
0.5% Yeast Extract
10 mM NaCI
2.5 mM KCI
10 mM MgCI2
10 mM MgSO4
20 mM glucose
NaOH調pH值至7.0