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脂質(zhì)體在腦膠質(zhì)瘤中的應(yīng)用

在所有原發(fā)性腦腫瘤中，惡性腦膠質(zhì)瘤仍然是世界范圍內(nèi)的一個(gè)重大問(wèn)題：侵襲性腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞迅速浸潤(rùn)并破壞正常組織結(jié)構(gòu)，由于存在由內(nèi)皮細(xì)胞單層網(wǎng)絡(luò)形成的血腦屏障，大多數(shù)治療藥物無(wú)法直接輸送至大腦。

設(shè)計(jì)思路

研究者構(gòu)建了一個(gè)多功能靶向脂質(zhì)體系統(tǒng)。將天然化合物白藜蘆醇摻入脂質(zhì)體的雙層膜內(nèi)，對(duì)氨基苯基-α-D-甘露-吡喃糖苷和小麥胚芽凝集素則結(jié)合到脂質(zhì)體表面。將表柔比星作為抗癌藥物加載到脂質(zhì)體中，制備了具有穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的多功能靶向脂質(zhì)體。然后，應(yīng)用于體外膠質(zhì)瘤細(xì)胞和血腦屏障模型以及體內(nèi)攜帶C6膠質(zhì)瘤的大鼠。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

制備過(guò)程

該實(shí)驗(yàn)研究者使用雞蛋磷脂酰膽堿（EPC）、膽固醇和聚乙二醇二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（PEG2000-DSPE）（52:43:5，mmol/mmol）在梨形燒瓶中用甲醇溶解。使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在真空條件下將甲醇蒸發(fā)至干燥，然后在水浴中，使其與250 mM硫酸銨水合5分鐘。懸浮液用超聲波細(xì)胞破碎器處理3分鐘（200 W），并先后通過(guò)孔徑分別為400 nm和200 nm的聚碳酸酯膜擠3次。擠壓后，將懸浮液與磷酸鹽緩沖鹽（PBS）進(jìn)一步透析（12000–14000分子質(zhì)量截止值）3次（每次8 h），獲得空白脂質(zhì)體。

多功能靶向脂質(zhì)體系統(tǒng)在血腦屏障的轉(zhuǎn)運(yùn)率（%）。

（A）24小時(shí)內(nèi)通過(guò)血腦屏障的運(yùn)輸比率（%）

（B）通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)試驗(yàn)測(cè)定血腦屏障的轉(zhuǎn)運(yùn)比（%），即用游離對(duì)氨基苯基-α-D-吡喃甘露糖苷作用于血腦屏障 30分鐘，然后分別在指定時(shí)間點(diǎn)施用表柔比星+白藜蘆醇脂質(zhì)體（用WGA和MAN修飾）或表柔比素+白藜醇脂質(zhì)體改性）。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（SD）表示。*P<0.05；**p<0.01；***p<0.001；****p＜0.0001。<>

結(jié)果表明，此多功能靶向脂質(zhì)體系統(tǒng)可顯著改善表柔比星和白藜蘆醇通過(guò)血腦屏障的轉(zhuǎn)運(yùn)，提高腦腫瘤動(dòng)物的存活率。這一發(fā)現(xiàn)將促進(jìn)非侵入性治療的進(jìn)一步發(fā)展，并為治療腦腫瘤提供參考。

更多研究

另兩位研究者分別用乳化蒸發(fā)法制備了tLyp-1修飾的隱丹參酮脂質(zhì)體 [CPT純度>97%,;t Lyp-1肽(序列CGNKRTR)]、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿(DMPC)、DSPE-PEG2000-MAL ;香dou素6 (coumarin 6,C6)、三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽(TCEP·HCl);熒光染料DiI、DiR]、用薄膜分散法制備雷公藤紅素脂質(zhì)體（雷公藤紅素脂質(zhì)體的最佳處方為：藥脂質(zhì)量比1∶40，磷脂與膽固醇質(zhì)量比6∶1，水化介質(zhì)為10%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的海藻糖溶液）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示tLyp-1修飾后的隱丹參酮脂質(zhì)體可跨越體外血腦屏障，并且可通過(guò)抑制腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖發(fā)揮抗腦膠質(zhì)瘤作用，雷公藤紅素脂質(zhì)體抑制腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的作用顯著，具有良好的臨床應(yīng)用前景。

如圖所示，在一定濃度范圍內(nèi)，雷公藤紅素脂質(zhì)體抑制腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的作用強(qiáng)于雷公藤紅素溶液。

參考文獻(xiàn)

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