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小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)
BS-2262 小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒
一、試劑盒組成
固相載體:預(yù)先包被小鼠BMPs捕獲抗體的96孔微孔板(每孔0.1ml)
酶標(biāo)記物:HRP標(biāo)記的小鼠BMPs檢測(cè)抗體(120μl)
底物系統(tǒng):TMB顯色液(6ml)+終止液(6ml)
標(biāo)準(zhǔn)品:6管凍干標(biāo)準(zhǔn)品(濃度范圍156.25-5000 pg/ml)
輔助試劑:洗滌緩沖液(20×濃縮液)、樣本稀釋液、封板膜
二、樣本處理
血清/血漿:
室溫凝固10-20分鐘,3000rpm離心10分鐘取上清
避免溶血(血漿需EDTA/檸檬酸鹽抗凝)
細(xì)胞上清:
3000rpm離心10分鐘去除顆粒
組織勻漿:
生理鹽水搗碎后3000rpm離心10分鐘
保存條件:
2-8℃保存≤24小時(shí),長(zhǎng)期保存需分裝凍存于-20℃
三、操作步驟
包被:
4℃過(guò)夜孵育(抗原濃度需優(yōu)化)
洗滌:
棄孔內(nèi)溶液,3次洗滌(每次3分鐘)
加樣:
樣本/標(biāo)準(zhǔn)品50μl+HRP抗體50μl,37℃孵育1小時(shí)
顯色:
TMB底物50μl,37℃避光10-30分鐘
終止:
加終止液50μl,15分鐘內(nèi)測(cè)OD值
四、結(jié)果計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線(xiàn)
樣本濃度:
樣本OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)
定量范圍:
156.25-5000 pg/ml(靈敏度<10 pg/ml)
五、注意事項(xiàng)
試劑保存:
試劑盒2-8℃保存,有效期6個(gè)月
洗滌液結(jié)晶需水浴溶解后使用
操作規(guī)范:
避免交叉污染(加樣槍需校準(zhǔn))
終止液含強(qiáng)酸,接觸后立即沖洗
實(shí)驗(yàn)限制:
僅用于科研,不得用于臨床診斷
樣本值超范圍需重新稀釋測(cè)定
注:供科研使用,以上資料供參考,不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù),具體請(qǐng)咨詢(xún)技術(shù)老師或品牌商。
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