微生物木質(zhì)素(Lignin)ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)說(shuō)明書(shū)

　　BS-5184微生物木質(zhì)素(Lignin)ELISA試劑盒

　　1. 產(chǎn)品概述

　　本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，專(zhuān)用于定量檢測(cè)微生物發(fā)酵液、細(xì)胞裂解液等樣本中的木質(zhì)素含量。木質(zhì)素是微生物代謝或降解植物細(xì)胞壁過(guò)程中產(chǎn)生的芳香族聚合物，其含量變化可反映微生物對(duì)木質(zhì)纖維素的利用效率?。

　　2. 檢測(cè)原理

　　固相抗體包被微孔板捕獲樣本中的木質(zhì)素，再加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成"抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。洗滌后加入TMB底物顯色，450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，吸光度值與木質(zhì)素濃度呈正相關(guān)?。

　　3. 試劑盒組成

　　組分 96孔配置 48孔配置 保存條件

　　微孔酶標(biāo)板 12孔×8條 12孔×4條 2-8℃密封干燥

　　標(biāo)準(zhǔn)品(木質(zhì)素) 0.5mL×6管 0.5mL×6管 -20℃避光

　　樣本稀釋液 6mL 3mL 2-8℃

　　酶標(biāo)抗體-HRP 10mL 5mL 2-8℃避光

　　20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 室溫

　　TMB顯色液 9mL 4.5mL 2-8℃避光

　　終止液 9mL 4.5mL 室溫

　　封板膜 2張 2張 室溫

　　4. 樣本處理

　　4.1 微生物發(fā)酵液

　　8000×g離心10分鐘去除菌體

　　取上清液立即檢測(cè)或-80℃凍存(避免反復(fù)凍融)

　　4.2 細(xì)胞裂解液

　　超聲破碎后12000×g離心15分鐘

　　取上清液用PBS稀釋10倍后檢測(cè)

　　4.3 注意事項(xiàng)

　　樣本渾濁需0.22μm濾膜過(guò)濾

　　避免使用含疊氮鈉的樣本(抑制HRP活性)

　　5. 實(shí)驗(yàn)步驟

　　5.1 試劑準(zhǔn)備

　　洗滌緩沖液：蒸餾水稀釋20倍至1×工作液

　　標(biāo)準(zhǔn)品梯度：按說(shuō)明書(shū)稀釋至0-60μg/mL

　　5.2 加樣

　　標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各50μL加入對(duì)應(yīng)微孔

　　37℃孵育30分鐘

　　5.3 洗滌

　　每孔加300μL洗滌液，靜置1分鐘后拍干

　　重復(fù)5次

　　5.4 顯色

　　每孔加酶標(biāo)抗體100μL，37℃孵育30分鐘

　　洗滌后加TMB顯色液90μL，避光15分鐘

　　加終止液50μL終止反應(yīng)

　　5.5 測(cè)定

　　450nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值(參考波長(zhǎng)630nm)

　　6. 結(jié)果計(jì)算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。樣本濃度通過(guò)曲線(xiàn)方程計(jì)算，超出范圍需稀釋后復(fù)測(cè)。

　　7. 性能指標(biāo)

　　參數(shù) 指標(biāo)

　　靈敏度 ≤0.5μg/mL

　　檢測(cè)范圍 1-60μg/mL

　　精密度 批內(nèi)CV<8%，批間CV<12%

　　回收率 85%-115%

　　8. 注意事項(xiàng)

　　試劑盒使用前需室溫平衡30分鐘

　　不同批號(hào)試劑不可混用

　　終止液含強(qiáng)酸，操作時(shí)佩戴防護(hù)裝備

　　顯色液避免接觸金屬離子

　　微量移液器需校準(zhǔn)，避免交叉污染

　　9. 有效期

　　6個(gè)月(2-8℃保存)

　　10. 聲明

　　本產(chǎn)品僅供科研使用。

　　注：以上僅供參考，本試劑僅供科研使用，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢(xún)技術(shù)老師。

　　微生物木質(zhì)素(Lignin)ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)說(shuō)明書(shū) 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。本生試劑盒