小鼠肌鈣腔蛋白(SRL)ELISA檢測試劑盒技術(shù)說明書

　　BS-9444小鼠肌鈣腔蛋白(SRL)ELISA試劑盒

　　產(chǎn)品名稱?：小鼠心肌肌鈣蛋白I(cTnI)ELISA試劑盒

　　英文名稱?：Mouse cTnI ELISA KIT

　　檢測原理?：雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)?

　　適用范圍?：定量檢測小鼠血清、血漿及細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的cTnI濃度?

　　檢測范圍?：15.625–1000 pg/mL?

　　靈敏度?：7.81 pg/mL?

　　一、試劑盒組成

　　組分 規(guī)格(96T) 儲存條件

　　預(yù)包被抗體酶標(biāo)板 8×12孔 2–8℃密封

　　標(biāo)準(zhǔn)品(cTnI) 2支(凍干粉) 2–8℃

　　標(biāo)準(zhǔn)品/樣本稀釋液 14 mL/瓶 2–8℃

　　生物素化抗體 120 μL(100×) 2–8℃避光

　　酶結(jié)合物(HRP標(biāo)記) 120 μL(100×) 2–8℃避光

　　顯色底物(TMB) 12 mL/瓶 2–8℃避光

　　終止液(2M H?SO?) 10 mL/瓶 室溫

　　濃縮洗滌液(20×) 30 mL/瓶 室溫

　　二、操作流程

　　樣本準(zhǔn)備?：

　　血清/血漿樣本需離心去除雜質(zhì)，避免溶血;細(xì)胞上清液需澄清處理?。

　　建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定樣本稀釋倍數(shù)(通常1:10–1:100)，確保結(jié)果在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。

　　檢測步驟?：

　　加樣?：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或稀釋樣本，37℃孵育90分鐘?。

　　洗滌?：每孔注入洗滌液(350μL)，浸泡30秒后拍干，重復(fù)3次。

　　顯色?：加入生物素化抗體(100μL/孔)，37℃孵育60分鐘;洗滌后加入HRP酶結(jié)合物(100μL/孔)，37℃避光孵育30分鐘?。

　　終止?：加入顯色底物(100μL/孔)避光反應(yīng)15分鐘，終止液(50μL/孔)終止反應(yīng)。

　　結(jié)果讀取?：

　　450nm波長檢測吸光度(OD值)，參考標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度?。

　　三、注意事項(xiàng)

　　樣本處理?：

　　避免反復(fù)凍融樣本，短期內(nèi)使用可2–8℃保存，長期保存需-20℃或-80℃?。

　　高脂樣本可能導(dǎo)致假陽性，建議離心后取上清檢測。

　　操作規(guī)范?：

　　使用微量移液器時，吸嘴不可混用以防交叉污染?。

　　孵育時用封板膜密封酶標(biāo)板，避免蒸發(fā)或污染。

　　顯色底物需避光保存，終止液添加后應(yīng)立即讀取結(jié)果(顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)黃)。

　　質(zhì)量控制?：

　　每批次實(shí)驗(yàn)需設(shè)置空白孔(僅加稀釋液)和質(zhì)控品孔?。

　　批內(nèi)變異系數(shù)(CV)應(yīng)≤10%，批間相對極差≤10%?。

　　四、儲存與有效期

　　未開封試劑盒?：2–8℃保存，有效期6個月?。

　　開封后?：濃縮抗體及酶結(jié)合物需分裝凍存，避免反復(fù)凍融。

　　五、安全提示

　　終止液含強(qiáng)酸，操作時需佩戴手套及護(hù)目鏡。

　　廢棄樣本及試劑盒按生物危害廢物處理?。

　　聲明?：本試劑盒僅供科研使用。具體操作請以實(shí)際產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。

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