大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒的實驗原理

　　基于雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術，具體流程如下：

　　固相抗體包被?

　　微孔板預先包被抗VEGF-C單克隆抗體，形成固相捕獲抗體?。

　　抗原-抗體結合?

　　加入待測樣本(如血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清)，樣本中的VEGF-C與固相抗體特異性結合，形成“固相抗體-VEGF-C"復合物?。

　　酶標抗體反應?

　　加入生物素標記的抗VEGF-C多克隆抗體(檢測抗體)，與已結合的VEGF-C結合，形成“固相抗體-VEGF-C-酶標抗體"夾心結構?。

　　信號檢測?

　　洗滌去除未結合物質(zhì)后，加入過氧化物酶標記的親和素(鏈霉親和素-HRP)?。

　　加入底物TMB(四甲基聯(lián)苯胺)，HRP催化TMB顯色(藍色→黃色)，顏色深淺與VEGF-C濃度成正比?。

　　酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣本濃度?。

　　關鍵特性?：

　　檢測范圍通常為15.6–1000pg/ml?。

　　特異性針對VEGF-C亞型(如大鼠VEGF-C164)，避免與其他VEGF家族成員交叉反應?。

　　適用于科研實驗，不可用于臨床診斷?。

　　注意事項?：

　　樣本需避免反復凍融，血清/血漿樣本需使用無熱原試管收集?。

　　實驗重復性要求板內(nèi)變異系數(shù)<10%，板間<15%?。

　　注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術老師或品牌供應商。

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