大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書
以下是關(guān)于大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明綜合指南：
BS-3458 大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中T4水平。通過(guò)純化的大鼠T4抗體包被微孔板形成固相抗體，依次加入樣本、HRP標(biāo)記的T4抗體形成復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色后測(cè)定450nm吸光度(OD值)，其顏色深淺與T4濃度呈正相關(guān)。
二、試劑盒組成
組分 48孔配置 96孔配置 保存條件
酶標(biāo)包被板 1×48孔 1×96孔 2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)品(270μg/L) 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃
酶標(biāo)試劑 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃
顯色劑A/B液 各3ml×1瓶 各6ml×1瓶 2-8℃
終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃
濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃
三、樣本處理要求
血清：室溫靜置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后，1000×g離心20分鐘取上清，避免反復(fù)凍融
血漿：EDTA/肝素抗凝采集，30分鐘內(nèi)2-8℃ 1000×g離心15分鐘
組織勻漿：PBS沖洗后稱重剪碎，按重量體積比1:9加入生理鹽水勻漿，2000-3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘取上清
四、操作步驟
加樣：標(biāo)準(zhǔn)品/樣本加入對(duì)應(yīng)孔，建議做復(fù)孔
孵育：37℃溫育30分鐘
洗滌：甩干孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液靜置30秒后甩干，重復(fù)5次
加酶標(biāo)試劑：每孔50μl，37℃避光孵育30分鐘
顯色：依次加入顯色劑A/B各50μl，37℃避光反應(yīng)15分鐘
終止：每孔加終止液50μl
檢測(cè)：450nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值(建議5分鐘內(nèi)完成)
五、結(jié)果計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
樣本濃度=標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)應(yīng)值×稀釋倍數(shù)
檢測(cè)范圍：0.703-45ng/ml，靈敏度0.422ng/ml
六、注意事項(xiàng)
試劑使用前需平衡至室溫(20-25℃)
不同批號(hào)試劑不得混用
濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時(shí)需37℃溶解后使用
有效期6個(gè)月，2-8℃保存，避免反復(fù)凍融
七、技術(shù)支持
部分廠商提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)及無(wú)效退換承諾，具體可咨詢供應(yīng)商。
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