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    液相色譜分法（HPLC），是在經(jīng)典液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種分析方法。因其樣品分析速度快，故稱液相色譜。目前，已在生物、醫(yī)學(xué)、有機(jī)化學(xué)、食品與飲料、環(huán)境監(jiān)測等諸多領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
    液相色譜分析儀一般由進(jìn)樣器、脫氣機(jī)、泵、色譜柱、柱溫箱、檢測器等組件構(gòu)成，如圖1所示。其原理是：待檢測物隨流動相被注入色譜柱，因不同類型待檢物與固定相的相互作用力不同而在色譜柱內(nèi)得到分離，后通過檢測器得到不同的峰信號。 

圖1液相色譜分析儀圖

    液相色譜分析儀為一個精密且昂貴的分析系統(tǒng)，如何規(guī)范操作、合理維護(hù)從而使各組件達(dá)到大壽命便顯得尤為重要。這里筆者推薦微孔過濾，來延長各組件的使用壽命。
（1）流動相的過濾
    流動相作為待檢物質(zhì)的載體，會依次通過脫氣機(jī)、高壓輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱，后進(jìn)入檢測器。流動相的質(zhì)量會直接影響相關(guān)組件的使用壽命。流動相若不進(jìn)行過濾，其內(nèi)部的顆粒便會進(jìn)入系統(tǒng)，造成小孔管道、色譜柱、高壓輸液泵的堵塞或損傷。
    安諾過濾建議流動相在使用前用0.45μm或0.22μm孔徑的Φ47mm濾膜匹配玻璃過濾器進(jìn)行過濾。也可以使用相同孔徑的Φ33mm針頭式濾器進(jìn)行過濾。流動相過濾除了可以去除細(xì)小顆粒外，同時還可以去除小氣泡，減輕脫氣機(jī)的負(fù)擔(dān)，減少分析過程中的波動。
（2）樣品進(jìn)樣前過濾處理
    液相色譜的待檢測樣品品種繁多，不同樣品顆粒含量和粒徑分布也差別極大。若未經(jīng)過濾直接進(jìn)樣，短時間內(nèi)就會導(dǎo)致色譜柱的堵塞，造成柱壓增高、使用壽命大幅下降，見圖2。
    因此，在進(jìn)樣前安諾推薦用0.45μm或0.22μm孔徑的針頭式濾器對樣品進(jìn)行過濾處理。一般可根據(jù)待處理樣品的體積，選擇合適規(guī)格的針頭濾器進(jìn)行處理。Φ5mm過濾量小（<1ml），滯留體積也?。?lt;15μl）；Φ13mm過濾量比前者要大一些(<10ml)；Φ25mm過濾量大（<80ml）。針對顆粒負(fù)載大的難過濾樣品，可以選擇含有玻纖或PP預(yù)過濾層的針頭式濾器處理。 

 

圖2 色譜柱壓與過濾的關(guān)系

    按照上述建議對流動相和待檢樣品進(jìn)行過濾，可極大程度地保證液相色譜的使用壽命。

過濾注意事項：
（1）請根據(jù)化學(xué)兼容性表，選擇合適的濾膜。
（2）請注意濾膜親疏水性。例如，疏水PTFE由于其自身的強疏水性，建議過濾有機(jī)溶劑但不推薦過濾水性溶液。
（3）由于過濾器或濾膜本身可能會出現(xiàn)UV吸收的干擾性物質(zhì)的溶出，而干擾物溶出產(chǎn)生的色譜峰過大，則會干擾實驗數(shù)據(jù)的分析與判斷。因此，強烈建議用戶優(yōu)先選擇對濾器或濾膜的UV吸收的干擾性物質(zhì)溶出進(jìn)行過驗證的廠家，如ANOW(安諾)、Millipore、Whatman等。