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制藥用無菌隔離系統(tǒng)的驗(yàn)證
發(fā)布時(shí)間：2019-6-27利用無菌隔離器進(jìn)行無菌操作之前，隔離器系統(tǒng)的驗(yàn)證必須完成。為了核實(shí)隔離器及其輔助設(shè)備能夠用于進(jìn)行無菌操作，隔離器系統(tǒng)的驗(yàn)證可以分成三個(gè)部分：安裝驗(yàn)證、性能驗(yàn)證、操作驗(yàn)證。在進(jìn)行無菌隔離器系統(tǒng)驗(yàn)證過程中，應(yīng)當(dāng)考慮到下面的觀點(diǎn)。在驗(yàn)證程序的特定階段（例如 IQ、OQ、PQ），各個(gè)階段試驗(yàn)的任務(wù)是不被確定的，在隔離器用于確定的檢測(cè)前，隔離器的功能應(yīng)當(dāng)被驗(yàn)證并且有文字記錄。
1、安裝確認(rèn)IQ
IQ 階段包括隔離器系統(tǒng)詳細(xì)的外觀描述，例如隔離器尺寸、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、所用的材料。關(guān)于接觸面和傳遞系統(tǒng)，要清晰的畫圖并標(biāo)注尺寸。設(shè)計(jì)的隔離器是否符合使用的規(guī)格需要被核實(shí)，例如空氣補(bǔ)給、真空、外部排氣、溫濕度控制等。其他與隔離器系統(tǒng)一起使用的設(shè)備也要詳細(xì)描述；任何設(shè)計(jì)規(guī)格的修訂都應(yīng)當(dāng)詳細(xì)描述。設(shè)備指南和復(fù)印件應(yīng)當(dāng)編成目錄并保存，在需要的時(shí)候，操作者可以得到并重新查閱。一旦設(shè)計(jì)規(guī)格符合性被核實(shí)，所有的圖紙、方法和設(shè)備圖要編成目錄，保存并能夠重新得到。
所有的文檔應(yīng)重新被審閱， 便于核實(shí)能夠反映出安裝系統(tǒng)的關(guān)鍵屬性要求。這樣就建立了符合隔離器系統(tǒng)設(shè)計(jì)規(guī)格和安裝要求通用的基準(zhǔn)。在故障模式下或高風(fēng)險(xiǎn)情況下進(jìn)行分析時(shí)， 可能導(dǎo)致試驗(yàn)失敗的潛在的過程控制問題和設(shè)備問題可能被發(fā)現(xiàn)，這些問題應(yīng)當(dāng)進(jìn)行鑒定并記錄在文檔中。如果必要，系統(tǒng)可以被修改，以便將失敗的風(fēng)險(xiǎn)降到低點(diǎn)，并且關(guān)鍵點(diǎn)的控制方法被建立。安裝確認(rèn)的結(jié)果被總結(jié)成為一個(gè)安裝確認(rèn)報(bào)告，建議包括下列文檔：
- 設(shè)備：設(shè)備應(yīng)符合設(shè)計(jì)規(guī)格并被列表記錄。 IQ 報(bào)告應(yīng)核實(shí)：符合設(shè)
計(jì)規(guī)格的設(shè)備被接收，并且按照生產(chǎn)廠商的要求進(jìn)行安裝。
- 結(jié)構(gòu)材質(zhì)：隔離器系統(tǒng)關(guān)鍵部位的結(jié)構(gòu)材質(zhì)經(jīng)檢測(cè)是符合設(shè)計(jì)要求的。
對(duì)隔離器材質(zhì)的殺菌方法兼容性應(yīng)當(dāng)被核實(shí)。
- 儀表：儀表被核實(shí)符合其精度要求并列表。
- 功能規(guī)格：所有操作功能，例如在操作手冊(cè)、流程、儀器圖表中指明
的功能，都應(yīng)當(dāng)被核實(shí)能夠執(zhí)行并且符合規(guī)格要求。隔離器系統(tǒng)和其他系統(tǒng)的所有連接部分應(yīng)進(jìn)行審核，其功能應(yīng)被核實(shí)符合設(shè)計(jì)要求。
- 過濾器證明：HEPA 過濾器和微生物截留過濾器的測(cè)試和證書；測(cè)試結(jié)
果和證書復(fù)印件應(yīng)包括在 IQ 報(bào)告中。核對(duì)采購合同，核實(shí)空氣過濾系統(tǒng)符合規(guī)格要求。
- 計(jì)算機(jī)軟件：所有的和隔離器系統(tǒng)有關(guān)系的計(jì)算機(jī)軟件列出名稱、規(guī)格、
文檔編號(hào)。計(jì)算機(jī)系統(tǒng)盤被檢查貼簽并安全保存。
2、操作驗(yàn)證OQ
OQ階段核實(shí)隔離器系統(tǒng)的操作能夠符合說明書的功能。
- 操作性能檢查：這個(gè)試驗(yàn)核實(shí)所有的警報(bào)和警報(bào)的功能符合說明書要求。
系統(tǒng)所有設(shè)置點(diǎn)和可調(diào)整的參數(shù)都應(yīng)當(dāng)被核實(shí)符合規(guī)定的要求。
- 隔離器完整性檢測(cè)：在通常的操作條件下，隔離器應(yīng)保持完整性。在隔
離器載物并使用化學(xué)殺菌劑滅菌前，一個(gè)泄露試驗(yàn)可以證明隔離器符合廠家說明書要求并且是安全的。 為了避免外界污染， 隔離器通常在 20-80Pa正壓下進(jìn)行操作。如果隔離器系統(tǒng)要求一個(gè)恒定的正壓，驗(yàn)證過程中必須核實(shí)操作時(shí)的壓力設(shè)置值能夠維持并且可以控制。
- 滅菌周期確認(rèn)：執(zhí)行一個(gè)無菌周期，以便核實(shí)操作的實(shí)際數(shù)值與無菌期的各個(gè)步驟情況以及設(shè)置數(shù)值一致?？梢圆捎脦追N不同的滅菌方法來除去隔離器和輔助系統(tǒng)的微生物。 可以用于隔離器滅菌的化學(xué)試劑包括過氧乙酸、二氧化氯、臭氧、*，不同的試劑有不同的暴露條件和過程控制。選定的滅菌方法應(yīng)符合廠家的操作要求，并且在實(shí)用規(guī)程中對(duì)這些方法進(jìn)行描述是十分關(guān)鍵的。使用*蒸汽滅菌時(shí)，隔離器房間的溫度和濕度的控制是關(guān)鍵的。隔離器內(nèi)部的溫度也是重要的，尤其在使用*蒸汽滅菌過程中的影響是非常重要的，關(guān)鍵在于保持*的濃度，避免低于*的冷凝點(diǎn)。一些化學(xué)試劑，例如二氧化氯和臭氧，要求在滅菌前預(yù)先增加隔離器的濕度。如果采用對(duì)濕度有較高的要求的滅菌方法時(shí)，在 OQ中，控制濕度的能力必須被核實(shí)。
滅菌劑的濃度和濃度分布情況也是重要的。 當(dāng)滅菌劑以氣態(tài)或蒸汽狀態(tài)存在時(shí)，它的濃度可以通過化學(xué)指示劑、光譜方法或電極檢測(cè)。滅菌劑分布情況也可以使用化學(xué)指示劑測(cè)量（注意：化學(xué)指示劑僅能夠提供定性的而不是定量的信息）。
采用滅菌劑在氣態(tài)或蒸汽的狀態(tài)下進(jìn)行滅菌時(shí)，要求隔離器內(nèi)部使用風(fēng)機(jī)來均勻分布滅菌劑。風(fēng)機(jī)的位置和方向可以進(jìn)行調(diào)節(jié)以保證適宜的氣流分布。由于架子、設(shè)備、手套、袖子裝置和半身衣，能夠影響氣流分配模式，必須對(duì)隔離器滿載狀態(tài)下的氣流分布進(jìn)行檢測(cè)，物品的擺放情況進(jìn)行詳細(xì)描述并以文件形式記錄。有時(shí)使用更小的傳遞隔離器作為便攜式表面滅菌單元， 待驗(yàn)物品和輔助用具通過傳遞倉進(jìn)入隔離器之前，這些物品和用具在便攜式表面隔離器中進(jìn)行化學(xué)滅菌。在 OQ過程中，應(yīng)制定出便攜式表面滅菌器中物品和用具的擺放情況，審核擺放圖并記錄在 OQ上。（注意：化學(xué)滅菌劑作用在設(shè)備表面，因此，一些被遮蓋的設(shè)備表面能夠殘留微生物并存活） 。達(dá)到殺菌劑作用時(shí)間后，可以使用通過除菌裝置的新鮮空氣或其他方式處理過的新鮮空氣將殺菌劑從隔離器中移走。通過一個(gè)向外開放的通道，氣體通過排風(fēng)口排入大氣；或者通過一個(gè)密閉的通道，在通道中使用一個(gè)殺菌裝置移走并消除滅菌劑。如果使用一個(gè)向外開放的排風(fēng)通道，排放系統(tǒng)的氣流和安全性應(yīng)當(dāng)被檢測(cè)。
- 滅菌周期的研究 ：當(dāng) OQ完成后，進(jìn)行滅菌周期的研究以便建立日
常滅菌控制過程必要的參數(shù)。一些普遍使用在工業(yè)中的無菌工藝驗(yàn)證的方法是可行的，例如生物負(fù)荷量和過度殺滅。滅菌工藝進(jìn)行生物指示劑挑戰(zhàn)試驗(yàn)。生物指示劑的孢子數(shù)和耐熱性是已知的。無論如何，應(yīng)該得到生物指示劑真實(shí)的 D 值；（看生物指示劑 --- 耐熱性能試驗(yàn)《 55》）；從生物指示劑供應(yīng)商處獲得 D 值是可以接受的。如果不可能獲得準(zhǔn)確的 D 值，同時(shí)無法證明滅菌劑濃度的有效性，可以使用半個(gè)周期（循環(huán)）的方法對(duì)整個(gè)周期（循環(huán)）進(jìn)行確認(rèn)。
3、性能驗(yàn)證PQ
PQ是核實(shí)隔離器系統(tǒng)的功能是符合操作者的要求。 PQ過程完成后，滅菌周期是適合的，排出口的滅菌劑被檢測(cè)是適合的，所有的 PQ過程的數(shù)據(jù)應(yīng)該被統(tǒng)計(jì)，分析，存檔。
- 清洗確認(rèn)：在通常情況下，對(duì)于有些無菌操作來說，清潔不是關(guān)鍵的，
但是，殘留的產(chǎn)品可能會(huì)對(duì)檢驗(yàn)有影響，有殺菌效果產(chǎn)品的殘留對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響尤其顯著，在檢測(cè)低水平污染時(shí)，這些殘留的物質(zhì)會(huì)對(duì)檢測(cè)產(chǎn)生影響。由于粉末容易擴(kuò)散，殺菌性粉末產(chǎn)品的殘留對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響是重要的。對(duì)于無菌檢驗(yàn)隔離器系統(tǒng)和操作者的要求來說，沒有肉眼可見污染這種清洗水平是合適的。清洗方法、周期、設(shè)備、清洗隔離器中所用的材料記錄在文件中。
- 無菌驗(yàn)證：隔離器內(nèi)表面、隔離器內(nèi)的設(shè)備、拿進(jìn)隔離器的各種物料都
應(yīng)當(dāng)去除微生物。隔離器表面、無菌檢驗(yàn)設(shè)備、檢驗(yàn)物品的滅菌和產(chǎn)品接觸部位或者產(chǎn)品藥物成分接觸部位的滅菌是不同的。隔離器滅菌可以用過度滅菌的 log 降低值來評(píng)估實(shí)現(xiàn)。如果超過滅菌周期，無菌保證水平不再被確定。隔離器滅菌操作完成之后，通過空氣過濾系統(tǒng)的維持，好的物品傳遞技術(shù)的采用，更重要的是：經(jīng)過無菌處理的隔離器手套完整性的保持，隔離器的無菌性被保證。
通過陰性分?jǐn)?shù)法或者過度殺滅法可以證實(shí)，用于隔離器、試驗(yàn)物品、無菌檢驗(yàn)用設(shè)備的滅菌方法可以使某種合適的、高抗性的生物指示劑的微生物數(shù)下降 6 個(gè) log 降。（看用于滅菌的生物指示劑《 1035》）。過度殺滅分析法適用于每單位 104孢子數(shù)的生物指示劑，而陰性分?jǐn)?shù)法適用于每單位孢子數(shù)大于等于 105的生物指示劑。使用足夠數(shù)量的生物指示劑進(jìn)行試驗(yàn)可以從統(tǒng)計(jì)學(xué)上證明滅菌效果是可以再現(xiàn)的以及滅菌劑的分布是合適的。隔離器內(nèi)設(shè)備和物品滿載時(shí)，需要用更多的指示劑進(jìn)行試驗(yàn)。因此，沒有一個(gè)或者更多的足夠量的傳感器來測(cè)量殺菌劑的濃度時(shí)，增加生物指示劑的放置是可以考慮的。在連續(xù)三次滅菌試驗(yàn)中，六個(gè) log 降的殺菌能力是證明可以滅菌的。操作者建立隔離器再次滅菌的周期。這個(gè)周期可以是短短的幾天，也可以是幾周的時(shí)間，建立的依據(jù)是無菌保持能力（看隔離器內(nèi)部環(huán)境無菌保持）
- 隔離器內(nèi)部環(huán)境的無菌保持：在一個(gè)無菌周期內(nèi)， 隔離器系統(tǒng)保持內(nèi)
部環(huán)境無菌的能力必須被驗(yàn)證。隔離器系統(tǒng)出現(xiàn)故障或者隔離器內(nèi)部的偶然污染情況下的微生物必須被檢測(cè)。微生物檢測(cè)通常包括一個(gè)例行的取樣程序，它可以包括，例如，滅菌后的天和無菌保持期的zui后一天。放置在隔離器中的培養(yǎng)基被證明是無菌的。隔離器內(nèi)部可以使用平面接觸雙碟或者棉簽搽拭監(jiān)控。然而，因?yàn)榕囵B(yǎng)基殘留會(huì)使隔離器產(chǎn)生染菌的風(fēng)險(xiǎn)，因此，在檢驗(yàn)完成后進(jìn)行檢測(cè)。如果試驗(yàn)中有培養(yǎng)基殘留，細(xì)心地從隔離器內(nèi)部清理干凈。空氣取樣和培養(yǎng)基檢測(cè)雙碟可以使用，但它們?cè)跈z測(cè)隔離器內(nèi)部非常低水平的污染時(shí)不是很靈敏。zui可能污染的途徑是檢驗(yàn)用具和樣品進(jìn)入隔離器的過程。驗(yàn)證所有進(jìn)入隔離器內(nèi)部的物品是無菌的這一點(diǎn)是關(guān)鍵的，也應(yīng)當(dāng)定期檢查墊圈，確保其完整，避免微生物的進(jìn)入。手套和半身衣是另一個(gè)可能產(chǎn)生污染的來源。因?yàn)椴僮髡叽髦痔滋幚頍o菌檢驗(yàn)物品，所以手套是應(yīng)當(dāng)特別關(guān)注的，手套上微小的破損很難檢查出來，手套在使用時(shí)，在拉伸情況下，手套上微小的破損可以體現(xiàn)出來（注意：培養(yǎng)基接觸法檢測(cè)手指菌落的方法，在檢測(cè)低水平的污染時(shí)靈敏度是不足的。用 0.1%的蛋白胨水溶液浸泡手套，將溶液過濾，然后將濾膜放在生長(zhǎng)培養(yǎng)基碟子上檢測(cè)，這個(gè)方法可以檢測(cè)出其他方法檢測(cè)不出的泄露。）
隔離器內(nèi)部進(jìn)行連續(xù)的塵埃粒子檢測(cè)是理想的，這樣可以快速檢測(cè)到過濾器的泄露。 第二個(gè)選擇是使用便攜式的塵埃粒子檢測(cè)器進(jìn)行周期檢測(cè)。塵埃粒子檢測(cè)取樣不能對(duì)隔離器內(nèi)部的無菌環(huán)境產(chǎn)生風(fēng)險(xiǎn)。
- 無菌檢驗(yàn)結(jié)果的解釋：如果人員沒有直接接觸工作區(qū)，驗(yàn)證過的傳輸通
道沒有破損，隔離器內(nèi)部微生物被去除并有一個(gè)高的無菌保證水平，那么，無菌檢驗(yàn)中的假陽性是很難出現(xiàn)的。然而，隔離器是一種機(jī)械裝置，好的無菌操作技術(shù)仍然是必須的。只有充分地符合“無菌檢驗(yàn)檢測(cè)和調(diào)查《 71》的情況下，才能下陽性結(jié)果無效這個(gè)結(jié)論。
- 培訓(xùn)和安全：因?yàn)闊o菌檢驗(yàn)操作在潔凈室進(jìn)行，操作者針對(duì)隔離器專門
程序進(jìn)行培訓(xùn)。所有的培訓(xùn)記錄和操作者操作的評(píng)估應(yīng)有一個(gè)單獨(dú)的記錄并且存檔。對(duì)所有進(jìn)行操作或者維護(hù)隔離器的人員進(jìn)行必要的安全培訓(xùn)是必須的。人員使用殺菌劑的安全性必須被評(píng)估。 使用殺菌劑的直接區(qū)原材料的安全數(shù)據(jù)或者一個(gè)類似安全數(shù)據(jù)文件是必要的。貯藏和安全方面的預(yù)防措施應(yīng)當(dāng)符合規(guī)定。在隔離器使用之前，隔離器和所有連接的通道安全檢查應(yīng)當(dāng)被執(zhí)行。