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超濾產(chǎn)品在生物醫(yī)學(xué)納米載體制備中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2018/6/8
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 1908年,Paul Ehrlich受到“魔法子彈”概念的啟發(fā),在理論上描述了將毒性藥物組裝到所謂的“納米載體”上。如今,納米載體已在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域有多種應(yīng)用。這些特殊納米材料的一項(xiàng)關(guān)鍵應(yīng)用就是藥物定向輸送,它們可發(fā)揮藥物活性成分轉(zhuǎn)運(yùn)模塊(即:納米顆粒、囊泡或膠束) 的作用。人們推測這種方式與傳統(tǒng)給藥方法相比對人體更為有效,且毒性更低。除了藥物輸送外,過去數(shù)十年間還發(fā)展出其他一些應(yīng)用納米載體的領(lǐng)域,例如利用金屬納米顆粒進(jìn)行磁共振成像或干細(xì)胞基因治療,或者利用量子點(diǎn)進(jìn)行光學(xué)成像。

納米載體可以按照其初始材料 (即:金屬、脂質(zhì)、聚合物和蛋白) 以及制成后的構(gòu)成 (即:囊泡、顆粒和膠束) 進(jìn)行分類。一般而言,水性介質(zhì)中納米顆粒混懸液或囊泡分散液的制備包括三個(gè)步驟:

a) 納米載體組裝 

(例如通過注射、薄膜水化或反相蒸發(fā))

b) 純化 (例如色譜、透析或超濾) 

 c) 濃縮 (如超濾或蒸發(fā))

這份短篇綜述舉例介紹了近期關(guān)于納米載體制備的一些文獻(xiàn)。重點(diǎn)介紹了濃縮和純化步驟,該步驟使用不同孔徑(相應(yīng)的截留分子量(MWCO)) 的Sartorius Vivaspin® 或Vivaflow® 設(shè)備通過超濾完成。Vivaspin® 系列產(chǎn)品的體積范圍是從0.5 mL至20 mL,而Vivaflow® 系統(tǒng)則涵蓋了從0.05升到5升的范圍。因此,Sartorius能夠處理的樣本體積、膜材料和MWCO范圍,可滿足不同預(yù)期用途的需求。這方面的挑戰(zhàn)包括合成后的緩沖液更換、脫鹽和清洗、去除溶解的化合物或聚集物。

純化過程十分重要,通過純化可以達(dá)到等滲狀態(tài),以便在體內(nèi)應(yīng)用時(shí)避免發(fā)生聚集或凝聚,還可去除毒性藥物、配體或其他可能引起副作用的物質(zhì)。濃縮步驟的重要意義在于調(diào)節(jié)藥物中活性成分的含量,以便達(dá)到預(yù)期的治療或診斷效果。

純化時(shí),通過分子排阻色譜 (SEC) 將游離物質(zhì) (起始材料) 與預(yù)期得到的納米載體分離,這不可避免地導(dǎo)致產(chǎn)物稀釋,并且需要后續(xù)的濃縮步驟。相比之下,透析過濾純化時(shí)不會(huì)導(dǎo)致顯著的稀釋,但如果需要較高的納米載體濃度,仍需要使用濃縮步驟。兩種分離方法均需要大量昂貴且耗時(shí)的手工操作。通過Vivaspin® 離心或者使用Vivaflow® 系統(tǒng)的蠕動(dòng)泵進(jìn)行超濾可克服這一缺點(diǎn)。該技術(shù)成本較低,操作迅速,人工操作極少。值得一提的是,純化和濃縮步驟可同時(shí)進(jìn)行。

納米載體純化后,通常需要測定載藥量 (偶聯(lián)或包囊效率)。偶聯(lián)或包囊效率是描述和鑒定納米載體的一個(gè)參考值。其他重要性質(zhì)包括ζ電位和粒徑分布,后者可通過光子相關(guān)光譜 (PCS)、高分辨率傳遞電子顯微鏡 (HRTEM) 成像或動(dòng)態(tài)光散射 (DLS) 測定。在進(jìn)行這些不同的鑒定前,需要成功地對混懸液或分散液進(jìn)行純化和濃縮。


 

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