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電動移液器制備384孔板，快穩(wěn)準
在高通量應(yīng)用中，384孔板的制備越來越普遍，與此同時，減少樣品制備差異和用戶錯誤的需求也在增加。
賽多利斯Picus® Nxt 電動移液器可簡化樣品制備流程，提高速度和準確度。其具有的多種功能不僅可減少移液錯誤，還允許用戶更快生成數(shù)據(jù)。
384孔板實驗應(yīng)選擇哪種移液器？
選擇移液器時，必須考慮每個移液器的工作量程。移液器在其標稱(最大)容量下可提供較精確性能。因此，雖然使用單個移液器覆蓋大容量范圍非常方便，但選擇多個移液器將確保獲得可靠的結(jié)果。表1列出了基于應(yīng)用和所需容量推薦的移液器。
表1
如何將樣品從96WP轉(zhuǎn)到384WP ？
制備384WP檢測時，通常是從96孔板(96WP)格式的樣品或標準來轉(zhuǎn)移。多通道移液器可輕松將96WP轉(zhuǎn)到384WP。與手動移液相比，使用電動移液器有助于加快孔板的樣品轉(zhuǎn)移進程(表2)。另一個好處是，電動移液器的孔板向?qū)Чδ苡兄谟脩粼诿看挝汉团乓翰襟E中始終了然加樣的孔位。
表2
如何在384WP 移液中使用孔板向?qū)Чδ埽?nbsp;
處理少量樣品時，保持正確的孔與移液間的順序是一項挑戰(zhàn)。電動移液器可以使用孔板向?qū)Чδ芊乐勾祟愬e誤。例如，將Picus® 移液器的孔板向?qū)Чδ茉O(shè)置為按列或按行移液，并報告下一行接收液體的孔。
多通道移液器上的孔板向?qū)Чδ芸娠@著提高用戶對384WP 制備的信心和速度。
如何在384WP中進行細胞接種和補液？
為了在384WP的每個孔中獲得準確細胞數(shù)，須以適當方式制備細胞懸液或稀釋液。這只需通過根據(jù)良好移液操作對電動移液器進行編程即可(表3)。
表3
不良移液操作(快速排液、產(chǎn)生氣泡)以及在細胞接種后立即將孔板放入培養(yǎng)箱，會導(dǎo)致細胞在孔中分布不均勻(圖1A)。與良好移液操作相比，這可能會導(dǎo)致細胞數(shù)量在細胞接種后24小時內(nèi)減少70%。良好移液操作可實現(xiàn)均勻細胞分布和良好細胞活力(圖1B)。
圖1. B16F10 小鼠黑色素瘤細胞以(A)不良和(B)良好移液操作在384 孔板中接種。
可通過調(diào)節(jié)電動移液器的吸液和排液速度，以溫和方式進行細胞培養(yǎng)補液(培養(yǎng)基更換)，盡量降低分離粘附細胞的風險。移液速度過快或正向移液會產(chǎn)生氣泡并對實驗產(chǎn)生負面影響(圖2A)。該問題可通過反向移液或使用多次分液模式輕松避免，該模式無需最后一次吹空即可輸送目標體積(圖2B)。
圖2. 在384 孔板中接種細胞或向其分配細胞培養(yǎng)基時，移液模式很重要。
A)如果通過正向移液添加培養(yǎng)基，則會形成氣泡。細胞培養(yǎng)基DMEM + 10% FBS.
B)將培養(yǎng)基移至384 孔板的孔中，反向移液或多次分液不會形成氣泡。
多次分液模式顯著加快了384WP中細胞接種或培養(yǎng)基更換的速度(表4)。
表4
賽多利斯 iQue® Screener 的實驗制備應(yīng)使用哪種Picus® Nxt 移液器？
iQue® 試劑盒說明書包含了每個工作流程步驟的詳細描述，這些方案使用了Picus® 移液器開發(fā)。圖3和表5列出了我們?yōu)樵?84WP 中制備iQue® 人T細胞活化及細胞因子分析(TCA)試劑盒的每個步驟推薦的移液器和設(shè)置。
圖3
表5
總結(jié)
電動移液器在涉及384WP的細胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有許多優(yōu)勢。電動移液器的移液模式和速度等移液操作標準化有助于改善細胞健康，減少用戶間的差異，使實驗結(jié)果更具可重復(fù)性。孔板向?qū)Чδ苡绕溆兄诒苊庥脩粼陂L時間連續(xù)移液的工作流程中出錯。重要的是，電動移液器具有符合人體工程學(xué)的優(yōu)點，有助于防止用戶疲勞，從而進一步增強對數(shù)據(jù)準確度的信心。
