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支原體試劑盒的6大操作步驟
支原體試劑盒是用于在培養(yǎng)細(xì)胞中原位染色檢測(cè)支原體或其它原核生物的試劑盒，主要用于檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞中是否存在支原體污染。
操作步驟：
1.被檢細(xì)胞接種于無(wú)菌的6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，接種密度為1-2×104。同時(shí)，接種正常無(wú)支原體感染的同種細(xì)胞，作為陰性對(duì)照。
2.5天后，先吸去培養(yǎng)液，再加入1ml的固定液，靜置20min。
3.吸去固定液，晾干。
4.37℃避光放置15-20min或室溫靜置20～30min。
5.加入2ml滅菌超純水洗滌三次，直接風(fēng)干。風(fēng)干后加入一滴封片液，并以蓋玻片覆蓋。
6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā)，觀察細(xì)胞周圍是否有藍(lán)色熒光小點(diǎn)或串珠狀熒光小點(diǎn)。
培養(yǎng)細(xì)胞中的細(xì)菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)，但支原體污染在光學(xué)顯微鏡下不可見(jiàn)，必須通過(guò)特定的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)。
檢測(cè)支原體污染的方法有很多種，包括支原體分離培養(yǎng)、支原體特異酶檢測(cè)、RT-PCR檢測(cè)以及DNA熒光染色檢測(cè)。上述檢測(cè)方法中，除DNA熒光染色檢測(cè)外操作步驟相對(duì)比較煩瑣并且所需時(shí)間較長(zhǎng)。支原體試劑盒是通過(guò)染色來(lái)檢測(cè)支原體的，本試劑盒的熒光染色可快速、有效、高靈敏度地檢測(cè)支原體污染。
