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掌握這些知識，可以更加熟練的操作離心超濾管
掌握這些知識，可以更加熟練的操作離心超濾管
離心超濾管顧名思義，是可以進(jìn)行超濾的離心管子。具有較低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。應(yīng)用廣，包括生物樣品濃縮：包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物；組織培養(yǎng)提取物或細(xì)胞裂解液中大分子組分的純化；對稀釋或從柱洗脫液預(yù)先純化的蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮；脫鹽和緩沖液更換。
離心超濾管的操作步驟：
1.勻漿處理：
a.組織將組織在液氮中磨碎加入試劑，用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞直接在培養(yǎng)板中加入試劑裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。試劑用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心超濾管得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
離心超濾管的使用注意事項(xiàng)：
?。?）試劑不能與手接觸。
?。?）要用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈（藥勺要擦干）后，方可取用另一種試劑。
（3）試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后將離心超濾管放回原處。
?。?）已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
