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支原體試劑盒的應(yīng)用是大勢(shì)所趨
支原體試劑盒的應(yīng)用是大勢(shì)所趨
支原體試劑盒是用于在培養(yǎng)細(xì)胞中原位染色檢測(cè)支原體或其它原核生物的試劑盒，主要用于檢測(cè)培養(yǎng) 細(xì)胞中是否存在支原體污染。
培養(yǎng)細(xì)胞中的細(xì)菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)，但支原體污染在光學(xué)顯微鏡下 不可見(jiàn)，必須通過(guò)特定的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)支原體污染的方法有很多種，包括支原體分離培養(yǎng)、支原體特異酶檢測(cè)、RT-PCR檢測(cè)以及DNA熒光染色檢測(cè)。上述檢測(cè)方法中，除DNA熒光染色檢測(cè)外操作步 驟相對(duì)比較煩瑣并且所需時(shí)間較長(zhǎng)。支原體試劑盒是通過(guò)染色來(lái)檢測(cè)支原體的，本試劑盒的熒光染色可 快速、有效、高靈敏度地檢測(cè)支原體污染。
如果發(fā)現(xiàn)有支原體污染，建議更換無(wú)污染的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。如果有必要去除支原體，去除支原體污染。支原體試劑盒是利用支原體酶的這一特定活性，進(jìn)行選擇性的生物化學(xué)檢測(cè)。這些酶的存在提供了一種快速的篩選操作，能靈敏地檢測(cè)出樣本中的支原體污染。這些存活的支原體被溶解，然后釋放出來(lái)的 酶與支原體檢測(cè)試劑盒中提供的底物發(fā)生催化反應(yīng)，將ADP轉(zhuǎn)化成ATP。
一、支原體污染成為細(xì)胞培養(yǎng)的重大隱患:
1．研究表明，世界范圍內(nèi)超過(guò)15%的培養(yǎng)細(xì)胞都有支原體污染。
2．支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞造成多方面的影響，包括代謝、免疫或生化特性、生長(zhǎng)狀況、以及細(xì)胞存活 等多方面的改變。
3．支原體污染會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性、可靠性和準(zhǔn)確性。
4．支原體難以檢測(cè)，同時(shí)也很難消除。支原體能輕易地通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)濾膜，同時(shí)也能拮抗絕大多數(shù)的抗 生素，給細(xì)胞培養(yǎng)造成巨大損失。
二、常規(guī)檢測(cè)才能有效避免細(xì)胞支原體污染:
1．常規(guī)性的進(jìn)行支原體檢測(cè)是保證支原體試劑盒中不受到支原體污染影響的途徑。
2．傳統(tǒng)的支原體檢測(cè)方法需要在特殊的選擇性培養(yǎng)基作用下對(duì)樣品進(jìn)行培養(yǎng)，時(shí)間往往達(dá)數(shù)周，費(fèi)時(shí)，費(fèi)力并且無(wú)法獲得足夠的靈敏度和特異性。
