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徠創(chuàng)生物服務(wù)簡介

慢病毒具有廣泛的感染譜，可以有效感染分lie期和靜止期的細(xì)胞，并且能夠*穩(wěn)定表達(dá)外源基因，因而成為導(dǎo)入外源基因的有力工具?，F(xiàn)在慢病毒系統(tǒng)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用到各種細(xì)胞系的基因過表達(dá)、基因干擾以及活體動物實驗中。

服務(wù)內(nèi)容：慢病毒包裝的基因涉及常規(guī)的蛋白編碼基因及非編碼基因，比如：miRNA、lncRNA以及circularRNA等的過表達(dá)及干擾的慢病毒包裝服務(wù)。

慢病毒包裝服務(wù)價格與周期

服務(wù)編號	病毒滴度	規(guī)格	贈送陰性對照	價格	周期
LC1033	過表達(dá)慢病毒	過表達(dá)慢病毒，病毒滴度>10^8PFU/ml	1ml(>10^8PFU/ml)	詢價	6-8周
LC1034	干擾慢病毒	過表達(dá)慢病毒，病毒滴度>10^8PFU/ml	1ml(>10^8PFU/ml)	詢價	6-8周

慢病毒包裝服務(wù)實驗流程

a. 慢病毒過表達(dá)質(zhì)粒載體的構(gòu)建： 根據(jù)目的基因序列設(shè)計特異性擴增引物，采用高保真PCR技術(shù)從模板中調(diào)取目的基因CDS區(qū)連入核心載體。

b. 慢病毒干擾質(zhì)粒載體的構(gòu)建：合成目的基因的siRNA序列，退火成雙鏈，然后連入慢病毒干擾質(zhì)粒載體。

c. 非編碼基因過載體構(gòu)建：從模板中調(diào)取基因相應(yīng)的miRNA前體, 然后連入慢病毒核心質(zhì)粒（miRNA以基因組為模板，lncRNA和circularRNA根據(jù)需要可以用cDNA或基因組為模板）。

d. 慢病毒載體的包裝與濃縮純化： 核心質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒進(jìn)行高純度無內(nèi)毒素抽提，共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，轉(zhuǎn)染后8h 更換為*培養(yǎng)基，培養(yǎng)48和72h后，分別收集富含慢病毒顆粒的細(xì)胞上清，病毒上清液通過超離心濃縮病毒。

服務(wù)流程：

徠創(chuàng)客戶須知

1、適用于在難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中進(jìn)行的基因過表達(dá)或干擾研究，如原代神經(jīng)細(xì)胞，干細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞等；

2、適用于快速建立穩(wěn)定表達(dá)的特定基因細(xì)胞株；

3、適用于In vivo 實驗，包括穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株成瘤實驗、局部注射、活體動物的基因過表達(dá)或干擾等。

徠創(chuàng)生物服務(wù)承諾

提供完整客觀準(zhǔn)確的實驗報告。