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AF555 Tyramide Conjugates的常見問題分析解釋
發(fā)布時(shí)間：2026-4-30| 提 供 商 | 西安凱新生物科技有限公司 | 資料大小 | 877.3KB |
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·基本定義與化學(xué)結(jié)構(gòu)
AF555 TSA是一種橙紅色熒光染料，其激發(fā)波長約為555 nm，發(fā)射波長約為565 nm。它由Alexa Fluor 555熒光染料與酪胺分子通過共價(jià)鍵偶聯(lián)而成，具有高亮度、優(yōu)異的光穩(wěn)定性和良好的水溶性。
·基本信息介紹（資料卡）
中文名稱：AF555 酪胺綴合物；Alexa Fluor 555 酪胺綴合物；Alexa Fluor 555 酪胺共軛物；AF555酪胺;Alexa Fluor 555 酪胺
英文名稱：AF555 TSA;AF555 Tyramide；AF555 Tyramide Conjugates；AF555 TSA Conjugates；Alexa Fluor555 Tyramide；Alexa Fluor555 TSA
激發(fā)波長Ex(nm)：555
發(fā)射波長Em(nm)：565
儲(chǔ)存條件：-20℃避光避濕
純度：≥95%
儲(chǔ)存條件：-20℃以下冰凍、干燥保存，避免反復(fù)凍融
供應(yīng)商：西安凱新生物
安全性：
操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備，避免接觸皮膚和眼睛。
如不慎接觸，請(qǐng)立即用大量清水沖洗，并尋求醫(yī)療幫助。
·核心作用原理：
利用辣根過氧化物酶（HRP）的催化作用實(shí)現(xiàn)信號(hào)放大。具體過程是：與目標(biāo)抗原結(jié)合的一抗被HRP標(biāo)記的二抗識(shí)別后，在低濃度存在下，HRP催化AF555-酪胺氧化，生成高反應(yīng)性的自由基中間體。這些自由基在HRP活性位點(diǎn)周圍約10 nm范圍內(nèi)，與鄰近蛋白的酪氨酸殘基等發(fā)生共價(jià)結(jié)合，從而將大量AF555熒光分子原位沉積在目標(biāo)位置，實(shí)現(xiàn)信號(hào)指數(shù)級(jí)放大
·AF555 TSA 常見問題分析解釋
一、無信號(hào)或信號(hào)弱
HRP失活：檢查二抗/鏈霉親和素-HRP是否新鮮，可用DAB底物測試酶活性。
反應(yīng)條件不足：TSA孵育時(shí)間需10-30分鐘，確保反應(yīng)液含0.001%-0.003%新鮮H?O?。
靶點(diǎn)豐度低：嘗試4℃一抗過夜孵育，或適當(dāng)增加一抗?jié)舛取?/p>
二、背景過高
反應(yīng)過度：縮短TSA反應(yīng)時(shí)間至5-15分鐘，或使用專用終止液。
內(nèi)源性過氧化物酶：封閉步驟中加入3% H?O?處理10分鐘滅活。
洗滌不充分：每步洗滌3次×5分鐘，可增加吐溫-20至0.1%-0.3%。
三、多重標(biāo)記兼容性
順序標(biāo)記：第一輪TSA→3% H?O?滅活HRP 15-20分鐘→第二輪TSA。
光譜選擇：推薦組合AF488（綠）、AF555（橙紅）、AF647（遠(yuǎn)紅），確保光譜無重疊。
·相關(guān)試劑
Cyanine7 alkyne
Cyanine5.5 DBCO
AF 488 TFP ester
Cyanine3 DBCO
BDP TR hydrazide
R110 azide, 6- isomer
Cyanine5.5 tetrazine
FAM amine, 5-isomer
sulfo-Cyanine5.5 azide
sulfo-Cyanine3.5 amine
sulfo-Cyanine5.5 DBCO
BDP 576/589 NHS ester
LumiTracker Lyso Green
YODi-3, red fluorescent nucleic acid stain
Amine-PEG3-carboxylic acid, hydrochloride
YO-TAP-1, green fluorescent nucleic acid stain
TO-TAP-3, far-red fluorescent nucleic acid stain
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該試劑僅用于科研實(shí)驗(yàn)，不可用于人體