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·基本定義與化學(xué)結(jié)構(gòu)

PKH 26是一種紅色熒光染料。它的特性是能與細(xì)胞膜脂質(zhì)區(qū)穩(wěn)定結(jié)合，并呈現(xiàn)紅色熒光（最佳激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為551/567 nm）。基于這一特性，其主要用途包括：① 細(xì)胞的體外標(biāo)記；② 體外的細(xì)胞增殖分析；③ 體內(nèi)外的細(xì)胞示蹤研究。

·基本信息介紹（資料卡）

CAS號(hào)：154214-55-8

中文名稱(chēng)：PKH-26（RED）外泌體示蹤染料

英文名稱(chēng)：PKH 26； PKH-26 (RED)；PKH-26 Red Fluorescent Cell Linker Dye

分子量 ：961.32

分子式：C59H97IN2

性狀：固體

顏色：Brown to reddish brown

Emission (Em)：567

Excitation (Ex)：551

廠(chǎng)商：西安凱新生物

結(jié)構(gòu)式：

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃以下冰凍、干燥保存，避免反復(fù)凍融

安全性：

操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備，避免接觸皮膚和眼睛。

如不慎接觸，請(qǐng)立即用大量清水沖洗，并尋求醫(yī)療幫助。

·PKH 26細(xì)胞染色操作方法

（一）懸浮細(xì)胞（以6孔板為例）

細(xì)胞收集

離心：1000g，4°C，3–5分鐘

洗滌：PBS清洗2次，每次5分鐘

調(diào)整密度：1 × 10? /mL

染色

加入1 mL工作液，室溫孵育10–45分鐘

清洗

離心：400g，4°C，3–4分鐘，棄上清

PBS洗滌2次，每次5分鐘

檢測(cè)

用無(wú)血清培養(yǎng)基或PBS重懸，即可進(jìn)行熒光顯微鏡觀(guān)察或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)

（二）貼壁細(xì)胞（蓋玻片法）

細(xì)胞準(zhǔn)備

將細(xì)胞培養(yǎng)于無(wú)菌蓋玻片上

染色

取出蓋玻片，吸去多余培養(yǎng)基

加入100 µL工作液，輕搖使之均勻覆蓋細(xì)胞，室溫孵育5–30分鐘

清洗與檢測(cè)

吸去工作液

用培養(yǎng)基洗滌2次，每次5分鐘

熒光顯微鏡觀(guān)察

關(guān)鍵提示

濃度優(yōu)化：工作液最佳濃度（5–10 µM范圍）需根據(jù)具體細(xì)胞類(lèi)型進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定

避光操作：染色及孵育過(guò)程中注意避光，防止熒光淬滅

對(duì)照設(shè)置：建議設(shè)置未染色的細(xì)胞作為陰性對(duì)照

·相關(guān)試劑

dU (Deoxyuridine) phosphoramidite

JOE NHS ester, 5-isomer

sulfo-Cyanine7.5 NHS ester

TFA-amino modifier CPG 500

Biotin-PEG4-carboxylic acid

LumiTracker Mito Red CMXRos

Cyanine7 maleimide

sulfo-Cyanine7.5 azide

TAMRA DBCO, 5-isomer

sulfo-Cyanine3 tetrazine

JOE azide, 5-isomer

BDP FL amine

AF 568 DBCO

以上內(nèi)容均由西安凱新生物科技有限公司YNN編輯整理

該試劑僅用于科研實(shí)驗(yàn)，不可用于人體