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FITC-ECL在糖蛋白分離與純化的應(yīng)用中有何優(yōu)勢(shì)?其原理是什么?
發(fā)布時(shí)間:2026-4-15·化學(xué)組成與概述
凝集素來源:ECL/ECA是從雞冠刺桐種子中提取的植物凝集素,具有特定的糖結(jié)合活性。
熒光標(biāo)記:通過共價(jià)鍵將熒光素(如FITC)標(biāo)記在凝集素上,形成熒光標(biāo)記的ECL/ECA試劑。
分子結(jié)構(gòu):ECL/ECA由兩個(gè)不同亞基(約28 kDa和26 kDa)組成,標(biāo)記后分子量約為54-57 kDa。
·基本性能參數(shù)
中文名稱:FITC刺桐凝集素
英文名稱:Erythrina Cristagalli Lectin (ECL, ECA), Fluoresce;FITC-ECL;FITC-ECA
FITC的熒光特性
激發(fā)波長(zhǎng):495 nm
發(fā)射波長(zhǎng):515-521 nm,呈綠色熒光
儲(chǔ)存條件:-20℃以下冰凍、干燥保存,避免反復(fù)凍融。
純度:95%+
供應(yīng)商:西安凱新生物科技有限公司

安全性:
操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備,避免接觸皮膚和眼睛。
如不慎接觸,請(qǐng)立即用大量清水沖洗,并尋求醫(yī)療幫助。
·應(yīng)用場(chǎng)景
糖蛋白分離與純化:ECL/ECA可作為親和層析介質(zhì),用于從復(fù)雜生物樣品(如血清、細(xì)胞裂解液、組織勻漿)中特異性分離含有末端半乳糖或N-乙酰半乳糖胺的糖蛋白。
糖鏈結(jié)構(gòu)分析:通過熒光標(biāo)記功能,可在光鏡或電鏡下直接觀察凝集素與糖分子的結(jié)合位點(diǎn),實(shí)現(xiàn)糖鏈結(jié)構(gòu)的可視化分析。
·Erythrina Cristagalli Lectin (ECL, ECA), Fluoresce在糖蛋白分離與純化的應(yīng)用中有何優(yōu)勢(shì)?其原理是什么?
FITC-ECL在糖蛋白分離純化中的核心優(yōu)勢(shì)在于其高度特異的可逆結(jié)合特性和溫和的洗脫條件。
原理方面,ECL能特異性識(shí)別并結(jié)合糖蛋白表面的半乳糖(Galactose) 或 N-乙酰半乳糖胺(GalNAc) 糖鏈結(jié)構(gòu)。利用這一特性,將ECL固定在瓊脂糖等固相載體上制成親和層析柱:當(dāng)混合樣品流經(jīng)層析柱時(shí),帶有目標(biāo)糖鏈結(jié)構(gòu)的糖蛋白被特異性捕獲,而不含該結(jié)構(gòu)的蛋白則被洗脫除去。
優(yōu)勢(shì)方面:
其一,結(jié)合高度特異,唾液酸修飾會(huì)阻斷結(jié)合,因此可區(qū)分特定的糖基化類型;其二,洗脫條件溫和,用200 mM乳糖即可將結(jié)合的糖蛋白完整洗脫下來,不破壞蛋白活性,獲得高回收率;
其三,F(xiàn)ITC標(biāo)記便于在純化過程中進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光追蹤,可直觀監(jiān)測(cè)純化效果。
·相關(guān)試劑
AF 555 azide
Cyanine3.5 DBCO
BDP TR ceramide
DusQ 21 CPG 500
Cyanine7.5 NHS ester
R6G azide, 5-isomer
LumiTracker Mito JC-1
FAM CPG 500, 6-isomer
sulfo-Cyanine7 tetrazine
Cyanine3.5 carboxylic acid
sulfo-Cyanine7 dicarboxylic acid
sulfo-Cyanine7.5 dicarboxylic acid
QuDye dsDNA BR Reagent, 200x
以上內(nèi)容均由西安凱新生物科技有限公司YNN編輯整理
該試劑僅用于科研實(shí)驗(yàn),不可用于人體
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