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技術(shù)文章

FITC-ECL在糖蛋白分離與純化的應(yīng)用中有何優(yōu)勢(shì)?其原理是什么?

發(fā)布時(shí)間:2026-4-15

·化學(xué)組成與概述

凝集素來源:ECL/ECA是從雞冠刺桐種子中提取的植物凝集素,具有特定的糖結(jié)合活性。

熒光標(biāo)記:通過共價(jià)鍵將熒光素(如FITC)標(biāo)記在凝集素上,形成熒光標(biāo)記的ECL/ECA試劑。

分子結(jié)構(gòu):ECL/ECA由兩個(gè)不同亞基(約28 kDa和26 kDa)組成,標(biāo)記后分子量約為54-57 kDa。

·基本性能參數(shù)

中文名稱:FITC刺桐凝集素

英文名稱:Erythrina Cristagalli Lectin (ECL, ECA), Fluoresce;FITC-ECL;FITC-ECA

FITC的熒光特性

激發(fā)波長(zhǎng):495 nm

發(fā)射波長(zhǎng):515-521 nm,呈綠色熒光

儲(chǔ)存條件:-20℃以下冰凍、干燥保存,避免反復(fù)凍融。

純度:95%+

供應(yīng)商:西安凱新生物科技有限公司

凱新16.png


安全性:

操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備,避免接觸皮膚和眼睛。

如不慎接觸,請(qǐng)立即用大量清水沖洗,并尋求醫(yī)療幫助。

·應(yīng)用場(chǎng)景

糖蛋白分離與純化:ECL/ECA可作為親和層析介質(zhì),用于從復(fù)雜生物樣品(如血清、細(xì)胞裂解液、組織勻漿)中特異性分離含有末端半乳糖或N-乙酰半乳糖胺的糖蛋白。

糖鏈結(jié)構(gòu)分析:通過熒光標(biāo)記功能,可在光鏡或電鏡下直接觀察凝集素與糖分子的結(jié)合位點(diǎn),實(shí)現(xiàn)糖鏈結(jié)構(gòu)的可視化分析。

·Erythrina Cristagalli Lectin (ECL, ECA), Fluoresce在糖蛋白分離與純化的應(yīng)用中有何優(yōu)勢(shì)?其原理是什么?

FITC-ECL在糖蛋白分離純化中的核心優(yōu)勢(shì)在于其高度特異的可逆結(jié)合特性和溫和的洗脫條件。

原理方面,ECL能特異性識(shí)別并結(jié)合糖蛋白表面的半乳糖(Galactose) 或 N-乙酰半乳糖胺(GalNAc) 糖鏈結(jié)構(gòu)。利用這一特性,將ECL固定在瓊脂糖等固相載體上制成親和層析柱:當(dāng)混合樣品流經(jīng)層析柱時(shí),帶有目標(biāo)糖鏈結(jié)構(gòu)的糖蛋白被特異性捕獲,而不含該結(jié)構(gòu)的蛋白則被洗脫除去。

優(yōu)勢(shì)方面:

其一,結(jié)合高度特異,唾液酸修飾會(huì)阻斷結(jié)合,因此可區(qū)分特定的糖基化類型;其二,洗脫條件溫和,用200 mM乳糖即可將結(jié)合的糖蛋白完整洗脫下來,不破壞蛋白活性,獲得高回收率;

其三,F(xiàn)ITC標(biāo)記便于在純化過程中進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光追蹤,可直觀監(jiān)測(cè)純化效果。

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以上內(nèi)容均由西安凱新生物科技有限公司YNN編輯整理

該試劑僅用于科研實(shí)驗(yàn),不可用于人體


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