技術(shù)文章
AF594-α-Bungarotoxin簡單知識點講解,認(rèn)識基礎(chǔ)特點與作用
發(fā)布時間:2026-3-18
α-Bungarotoxin(α-BTX)
結(jié)構(gòu)特性:該毒素由61 - 62個氨基酸構(gòu)成,具備三個指狀結(jié)構(gòu)域以及四對二硫鍵,這些結(jié)構(gòu)共同形成了穩(wěn)定的三維構(gòu)象。它能夠特異性地結(jié)合神經(jīng)肌肉接頭(NMJ)處的煙堿型乙酰膽堿受體(nAChR,特別是α1亞基),進(jìn)而阻斷神經(jīng)沖動的傳遞。
功能優(yōu)勢:它具有高親和力(解離常數(shù)Kd約為10?? M)和高特異性,可用于對活細(xì)胞或組織中的nAChR進(jìn)行定位和定量分析。
Alexa Fluor594(AF594)
熒光特性:其激發(fā)波長為590 nm,發(fā)射波長為617 nm,屬于橙紅色熒光染料。它具有高量子產(chǎn)率(0.66)、良好的光穩(wěn)定性以及pH耐受性(pH范圍4 - 10),非常適合長時間成像以及多色熒光實驗。
化學(xué)活性:通過NHS酯與α-BTX的氨基(-NH?)發(fā)生共價偶聯(lián)反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵,此過程既保留了染料的熒光性能,又維持了毒素的生物活性。
偶聯(lián)方式:運用EDC/NHS催化體系對AF594的NHS酯基進(jìn)行活化,使其與α-BTX的賴氨酸殘基或其他活性氨基發(fā)生反應(yīng)。合成產(chǎn)率高于85%,純度大于95%,并且通過HPLC(高效液相色譜)/NMR(核磁共振)驗證了其結(jié)構(gòu)。
·基本信息介紹(資料卡)
英文名稱:AF594 α-Bungarotoxin;AF594-α-Bungarotoxin;α-BTX-AF594;α-Bungarotoxin, AF594;α-Bungarotoxin-AF594;Alexa Fluor 594-labeled α-Bungarotoxin ;α-BTX-Alexa Fluor 594
純度:≥95%
儲存條件:-20℃以下冰凍、干燥保存,避免反復(fù)凍融
安全性:
操作時需佩戴防護(hù)裝備,避免接觸皮膚和眼睛。
如不慎接觸,請立即用大量清水沖洗,并尋求醫(yī)療幫助。
·核心功能優(yōu)勢
標(biāo)記與動態(tài)追蹤
特異性受體標(biāo)記:α-BTX與nAChR具有*的結(jié)合能力,基于此特性,其偶聯(lián)物能夠精準(zhǔn)地對神經(jīng)元、肌肉細(xì)胞表面的nAChR進(jìn)行標(biāo)記。借助熒光顯微鏡,可清晰觀察受體在突觸后膜的聚集情況、分布狀態(tài)以及動態(tài)變化過程,如運輸、內(nèi)吞和外排等。
活細(xì)胞/活體成像:AF594具備強烈的熒光信號,這使得它能夠支持長時間的活細(xì)胞成像,例如在共聚焦顯微鏡的應(yīng)用中。通過這種成像方式,可實時監(jiān)測nAChR在細(xì)胞膜上的動態(tài)行為。此外,在斑馬魚胚胎等模式生物中,還能追蹤神經(jīng)肌肉接頭的發(fā)育過程。
多場景應(yīng)用兼容性:該偶聯(lián)物具有適用性,可應(yīng)用于多種技術(shù)場景。在免疫熒光技術(shù)中,可與抗神經(jīng)絲蛋白、突觸蛋白抗體聯(lián)合使用;在流式細(xì)胞術(shù)里,能夠分析細(xì)胞表面nAChR的表達(dá)情況;還可用于熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)以及熒光原位雜交(FISH)等技術(shù)。
·應(yīng)用場景與案例
神經(jīng)科學(xué)研究
突觸可塑性分析:通過標(biāo)記nAChR在突觸后膜的聚集情況,深入探究神經(jīng)肌肉接頭(NMJ)的發(fā)育、成熟過程以及退行性病變,例如肌側(cè)索硬化癥(ALS)。
受體動態(tài)追蹤:結(jié)合活細(xì)胞成像技術(shù),觀察nAChR在細(xì)胞膜上的運輸、內(nèi)吞以及循環(huán)過程,進(jìn)而揭示突觸信號傳導(dǎo)的機(jī)制。
·相關(guān)試劑
YODi-1, green fluorescent nucleic acid stain
QuDye Protein Quantification Reagent, 200x
Copper(II)-TВTA catalytic buffer, 1.5x
Singlet Oxygen Sensor Green (SOSG)
sulfo-Cyanine7.5 dicarboxylic acid
QuDye dsDNA BR Reagent, 200x
Cyanine3.5 carboxylic acid
LumiTracker Mito JC-1
Cyanine7.5 NHS ester
R6G azide, 5-isomer
BDPep FL NHS ester
Ethylenedimorpholine
Cyanine5 hydrazide
Azide-PEG3-iodide
以上內(nèi)容均由西安凱新生物科技有限公司YNN編輯整理
該試劑僅用于科研實驗,不可用于人體
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