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AF680 α-Bungarotoxin(AF680 α-BTX)的反應(yīng)原理與應(yīng)用特點(diǎn)
發(fā)布時(shí)間:2026-3-17·基本定義與化學(xué)結(jié)構(gòu)
1. α-Bungarotoxin
分子屬性:小分子量蛋白質(zhì),分子量約8 kDa。
偶聯(lián)位點(diǎn):含多個(gè)賴氨酸殘基及伯胺基團(tuán),為化學(xué)偶聯(lián)提供活性位點(diǎn)。
結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性:分子內(nèi)含二硫鍵,賦予其高穩(wěn)定性,并維持對(duì)乙酰膽堿受體的高親和力結(jié)合能力。
2. AF680熒光染料
光譜特性:近紅外熒光染料,吸收與發(fā)射波長(zhǎng)范圍為680–700 nm。
官能團(tuán)設(shè)計(jì):末端含NHS活化酯或其他活性基團(tuán),可與蛋白質(zhì)中的伯胺基發(fā)生共價(jià)結(jié)合。
·基本信息介紹(資料卡)
中文名稱: α-銀環(huán)蛇毒素 AF680;α-銀環(huán)蛇毒素 Alexa Fluor 680
英文名稱:AF680 α-Bungarotoxin;AF680 α-BTX;Alexa Fluor 680 α-Bungarotoxin;Alexa Fluor 680-α-Bungarotoxin;α-Bungarotoxin AF680;α-BTX-AF680
外觀:固體/液體
純度:≥95%
供應(yīng)商:西安凱新生物科技有限公司
儲(chǔ)存條件:-20℃以下冰凍、干燥保存,避免反復(fù)凍融
安全性:
操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備,避免接觸皮膚和眼睛。
如不慎接觸,請(qǐng)立即用大量清水沖洗,并尋求醫(yī)療幫助。
·反應(yīng)原理
1. 伯胺與活化酯的共價(jià)結(jié)合
染料活化形式:AF680通常以NHS酯形式存在,其活化酯末端含親電碳中心。
親核攻擊機(jī)制:α-Bungarotoxin表面的伯胺基(主要為賴氨酸ε-氨基)作為親核試劑,攻擊NHS酯的羰基碳原子。
鍵合過程:伯胺的孤對(duì)電子與羰基碳形成共價(jià)鍵,同時(shí)釋放N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)作為離去基團(tuán),最終生成穩(wěn)定的酰胺鍵。
2. 反應(yīng)條件優(yōu)化
pH環(huán)境:反應(yīng)在pH 7.5–8.5的緩沖體系(如磷酸鹽緩沖液PBS)中進(jìn)行,以維持蛋白質(zhì)天然構(gòu)象并確保伯胺基的高反應(yīng)活性。
溫度控制:采用溫和條件(室溫或4℃),防止α-Bungarotoxin因高溫變性或二硫鍵斷裂。
溶劑選擇:通過添加適量有機(jī)溶劑(如DMF、DMSO)或緩沖液(PBS),確保染料與蛋白質(zhì)充分溶解并均勻混合。
·應(yīng)用特點(diǎn)
受體特異性定位:依托α-Bungarotoxin對(duì)nAChR的高親和力特性,實(shí)現(xiàn)對(duì)神經(jīng)肌肉接頭或神經(jīng)元表面受體的精準(zhǔn)標(biāo)記。
近紅外熒光成像優(yōu)勢(shì):AF680的發(fā)射波長(zhǎng)特性適配深層組織成像需求,有效降低生物組織自發(fā)熒光對(duì)信號(hào)的干擾。
受體定量分析:通過檢測(cè)熒光信號(hào)強(qiáng)度,可定量評(píng)估受體表達(dá)水平或配體結(jié)合狀態(tài)。
生物相容性保障:酰胺鍵的化學(xué)穩(wěn)定性及溫和偶聯(lián)條件確保蛋白質(zhì)天然活性不受影響。
·相關(guān)試劑
AF 568 alkyne
Alkyne hydrazide
Cyanine7 hydrazide
BDP 650/665 azide
DusQ 2 CPG 1000
Cyanine5 tetrazine
SIMA azide, 6-isomer
Cyanine7.5 hydrazide
DusQ 21 carboxylic acid
BDP TMR carboxylic acid
sulfo-Cyanine7 tyramide
Cyanine7.5 carboxylic acid
Abasic phosphoramidite
BDP 630/650 maleimide
BDP 558/568 hydrazide
(E/Z)-4-Hydroxytamoxifen
DusQ 1 amidite, 5'-terminal
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