脂肪作為人體的三大供能營(yíng)養(yǎng)素之一，對(duì)人體有許多重要的生理作用。油脂中90% 以上是脂肪酸，而脂肪酸又分為飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸。多不飽和脂肪酸比如亞油酸和亞麻酸屬必需脂肪酸，是人體無(wú)法合成而必須從食物中獲取的。脂肪酸成分是食品質(zhì)量的重要指標(biāo)，因?yàn)樗峁┝擞嘘P(guān)含脂肪食品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的關(guān)鍵信息。食品中脂肪酸成分的測(cè)定通常使用有機(jī)溶劑從食物基質(zhì)中萃取脂肪含量，然后對(duì)甘油三酯進(jìn)行酸性水解或堿性水解，從而產(chǎn)生游離脂肪酸。通過(guò)與甲醇的酯化作用將這些游離酸轉(zhuǎn)化為甲基酯類 (FAMEs)，以增加其揮發(fā)性，從而使其適合 GC 分析。
2025年發(fā)布的征求意見(jiàn)稿中包含51種脂肪酸，涵蓋了GB5009.168和GB5009.257中所有的脂肪酸種類，從意見(jiàn)稿參考譜圖可以看到51種脂肪酸甲酯覆蓋范圍廣，部分組分在中后段存在密集出峰，對(duì)色譜分離能力和方法穩(wěn)定性提出了較高要求。
面對(duì)征求意見(jiàn)稿對(duì)食品中脂肪酸和反式脂肪酸測(cè)定的分析需求，如何兼顧復(fù)雜組分分離？本方案采用 Trace GOLD TR-FAME(P/N 260M238P)色譜柱，并基于 TRACE 1600 GC、AS1600 自動(dòng)進(jìn)樣器和 FID，圍繞51種脂肪酸甲酯的氣相色譜分析開(kāi)展方法復(fù)現(xiàn)與優(yōu)化，在保持關(guān)鍵困難化合物分離表現(xiàn)的同時(shí)，進(jìn)一步改善高沸點(diǎn)組分保留和高溫段基線表現(xiàn)，關(guān)鍵儀器條件如下：
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? 復(fù)現(xiàn)征求意見(jiàn)稿條件：關(guān)鍵分離表現(xiàn)達(dá)到預(yù)期，但仍有優(yōu)化空間
在征求意見(jiàn)稿程序升溫條件下用賽默飛TR-FAME色譜柱進(jìn)行51種脂肪酸甲酯測(cè)試見(jiàn)圖一，方案驗(yàn)證結(jié)果顯示：三組困難化合物的分離度與意見(jiàn)稿標(biāo)準(zhǔn)圖譜相當(dāng)；高沸點(diǎn)脂肪酸甲酯的保留強(qiáng)于意見(jiàn)稿；250 ℃高溫段出現(xiàn)較明顯的基線抖動(dòng)。因此可進(jìn)一步優(yōu)化程序升溫梯度，以兼顧分離與基線穩(wěn)定性。
圖一 GB程序升溫下51種脂肪酸甲酯譜圖
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? 優(yōu)化后結(jié)果：適當(dāng)降低高溫段溫度，未犧牲分離同時(shí)解決基線穩(wěn)定性
三組困難化合物的分離度與意見(jiàn)稿參考圖譜相當(dāng)，說(shuō)明在調(diào)整程序升溫后，關(guān)鍵分離能力得到保持。將高溫段溫度由250 ℃降低至235 ℃后，原有的基線抖動(dòng)問(wèn)題得到解決，優(yōu)化后譜圖基線表現(xiàn)更穩(wěn)定。見(jiàn)圖二
圖二 優(yōu)化后圖譜 0.025-0.15mg/mL
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? 方案價(jià)值：為新國(guó)標(biāo)落地提供可參考的GC-FID方法路徑
本方案圍繞征求意見(jiàn)稿食品中脂肪酸和反式脂肪酸測(cè)定需求，對(duì)51種脂肪酸甲酯分析條件進(jìn)行了針對(duì)性驗(yàn)證與優(yōu)化。結(jié)果表明，在保持困難組分分離表現(xiàn)的基礎(chǔ)上，通過(guò)調(diào)整程序升溫并適當(dāng)降低最高程序升溫溫度，可使高沸點(diǎn)組分在60 min前出峰，同時(shí)改善高溫段基線穩(wěn)定性。對(duì)于正在開(kāi)展新國(guó)標(biāo)方法準(zhǔn)備、方法轉(zhuǎn)移或?qū)嶒?yàn)室條件優(yōu)化的用戶，該方案可作為儀器條件與程序升溫設(shè)置的參考。
TR-FAME色譜柱及其他脂肪酸項(xiàng)目色譜柱信息：
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