要使酶聯(lián)免疫吸附劑測定測定得到準(zhǔn)確的結(jié)果，不論是定性的還是定量的，必須嚴(yán)格按照規(guī)定的方法制備試劑和實(shí)施測定。主要試劑的制備要點(diǎn)，如包被緩沖液、洗滌液、標(biāo)本稀釋液、結(jié)合物稀釋液、底物工作液和酶反應(yīng)終止液等，配制時不可掉以輕心。緩沖液可于冰箱中短期保存，使用前應(yīng)觀察是否變質(zhì)。蒸餾水的質(zhì)量在酶聯(lián)免疫吸附劑測定中也至關(guān)重要，使用新鮮重蒸餾的。不合格的蒸餾水可使空白值升高。
加樣、保溫、洗滌這三個步驟的正確性是標(biāo)準(zhǔn)化操作的前提條件。
1、Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒加樣應(yīng)該使用相同口徑的滴管，保持準(zhǔn)確的加樣姿勢，使每滴液體的體積基本相同。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時應(yīng)將液體加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出現(xiàn)氣泡。
2、Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒在酶聯(lián)免疫吸附劑測定中一般有二次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，此時反應(yīng)的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定的要求，保溫容器是水浴箱，可使溫度迅速平衡。各酶聯(lián)免疫吸附劑測定板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。
3、Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒洗滌在酶聯(lián)免疫吸附劑測定過程中不是反應(yīng)聚，但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯待塑料對蛋白質(zhì)的吸附作用是普遍性的。因此在酶聯(lián)免疫吸附劑測定測定的反應(yīng)過程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附，而在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。
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