篤瑪 牛脂蛋白a(LP-a) ELISA 試劑盒  產品信息




標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
3.  血清：使用不含熱原和毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分

離。
4.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
5.  細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
6.  組織勻漿：將組織加入適量理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
7.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍
公司秉承價格低，品質*，客戶之上的原則努力將優(yōu)秀的科學產品提供給廣大的科研工作者。
   
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常用標簽包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。
Flag標簽系統(tǒng)利用一個短的親水性八氨基酸肽（DYKDDDDK）融合到目標蛋白；其純化條件是非變性的，因此可以純化所有有活性的融合蛋

白。
His標簽是由6個組氨酸（His-His-His-His-His-His）組成的短肽，專門設計用于重組蛋白的吸附純化。由于分子量小，且較容易分離和

純化，是目前使用較廣泛的一種。
GST標簽體系具有蛋白表達率高，表達產物純化方便，利于GST抗體制備的特點。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，

在不變性的條件下通過親和層析得到。
GFP或其突變體EGFP等廣泛用于基因表達效率的檢測，以及和目的蛋白融合表達用于檢測目的蛋白的表達和分別。GFP抗體不經(jīng)可以檢測

GFP或其適當?shù)耐蛔凅w，也可以檢測和GFP或其適當?shù)耐蛔凅w融合表達蛋白的表達、細胞定位，以及純化、定性或定量檢測GFP融合表達

蛋白等。
Myc標簽（序列為：EQKLISEEDL）已成功應用于WB雜交技術、免疫沉淀IP和流式細胞術中。因此可用于檢測重組蛋白在細菌、酵母、昆蟲

細胞和哺乳細胞中的表達情況。Myc重組蛋白質可通過偶聯(lián)Myc標簽抗體到活化的瓊脂糖上而進行親和純化。但Myc重組蛋白的低pH洗脫條

件往往會降低蛋白質的活力，因此Myc標簽系統(tǒng)廣泛應用于檢測但很少用于純化。
HA標簽系統(tǒng)利用一個HA（influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA）短肽融合到目標蛋白。HA標簽可位于蛋白質的C端或N端，該系

統(tǒng)已廣泛應用于多種細胞類型，相應的HA標簽抗體也被廣泛運用。
MBP標簽蛋白大小為40kDa，由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋

白在細菌中表達，MBP可以融合在蛋白的N端或C端?？捎肕BP抗體或表達的目的蛋白特異性抗體檢測MBP標簽標記的重組蛋白。
其余標簽抗體還有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV

、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等，但應

用相對較少。

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樣品準備

1． 手術取出動物組織，并秤重以確定200毫克組織重量 
2． （選擇步驟）放進預冷的15毫升錐形離心管
3． （選擇步驟）加入xx毫升 清理液（Reagent A）清洗1次
4． 即刻用刀片切碎組織
5． 放進一個預冷的15毫升錐形離心管
6． 加入預冷的xx毫升 清理液（Reagent A）
7． 渦旋震蕩5秒，充分混勻
8． 即刻放入預冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約40至80下）
9． 將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管
10． 放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g
11． 移取500微升到新的1.5毫升離心管
12． 加入xx微升 穩(wěn)定液（Reagent B），混勻