微生物挑戰(zhàn)法，又稱微生物入侵法，屬于較為常見的一種密封完整性測(cè)試方法，通常與模擬灌裝同時(shí)進(jìn)行。試驗(yàn)通過(guò)模擬灌裝驗(yàn)證方案進(jìn)行培育基模擬灌裝，然后進(jìn)行壓塞軋蓋后，目檢是否合格，已經(jīng)驗(yàn)證的滅菌柜滅菌后，把容器密封面浸入到菌液中，使樣品容器內(nèi)的培育基完quan接觸封口內(nèi)表面，樣品的封口和頸部的外表面應(yīng)浸泡在菌懸液中，浸泡肯定時(shí)間后取出，定期培育后檢查是否有微生物侵入，以確定容器密封系統(tǒng)的完整性。同時(shí)，需要做陽(yáng)性對(duì)比試驗(yàn)，確認(rèn)培育基的促生長(zhǎng)力量。

檢測(cè)設(shè)備：

                                                                 LT-PNP微生物入侵試驗(yàn)儀

試驗(yàn)方法：

1、把50個(gè)經(jīng)滅菌的試樣，分開編號(hào)，充分侵入菌懸液中，同時(shí)將試樣平放，使袋內(nèi)的無(wú)菌培育基充分接觸焊接部位的內(nèi)表面，試樣容器在菌懸液中持續(xù)浸泡4小時(shí)。

2、浸泡結(jié)束時(shí)再取一份菌懸液，用平板計(jì)數(shù)菌懸液的濃度。

3、從菌懸液中取出試樣，擦干試樣容器外殘余的菌懸液，然后用含0.5%過(guò)乙酸的70%異丙醇消毒容器外表面。

4、取裝滿培育基樣品兩個(gè)，作陽(yáng)性對(duì)比，其外表用含0.5%過(guò)乙酸的70%異丙醇消毒，接種入10~～100CFU銅綠假單胞菌。

推斷標(biāo)準(zhǔn)：

1、步驟2、步驟4、5中進(jìn)行的養(yǎng)分性試驗(yàn)都合格，試樣的挑戰(zhàn)試驗(yàn)方可有效。

2、在挑戰(zhàn)試驗(yàn)開頭時(shí)，挑戰(zhàn)用菌懸液濃度（活菌數(shù)）必需達(dá)到1×106CFU/ml。

3、挑戰(zhàn)試驗(yàn)中如長(zhǎng)菌，需記錄長(zhǎng)菌的試樣數(shù)，并按下述要求作進(jìn)一步調(diào)查。

4、仔細(xì)檢查容器各部位封口處是否有缺損，以免造成微生物浸入。

5、把看到的試樣容器封口的缺陷，拍照并且具體記錄。