T4 RNA連接酶
英文名稱：T4 RNA Ligase 
分子量：43.6kDa，單體
級別：BR
來源：含有T4噬菌體克隆基因63的大腸桿菌
濃度：10u/ul 
活性定義：是指在37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol 5'-[32P]-(A)12-18轉(zhuǎn)化為磷酸酶抗性形式所需的酶量
酶活性分析混合物：50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端）
保存液組分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA，0.5mM ELUGENT變性劑和50%(v/v)甘油
10×反應(yīng)緩沖液：500mM HEPES-NaOH(PH8.0，25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT
抑制劑：金屬螯合劑、SH基團修飾試劑
失活：70℃加熱10分鐘
質(zhì)量控制：測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
備注：反應(yīng)體系中ATP的濃度取決于連接反應(yīng)的類型，*的BSA反應(yīng)濃度是0.1mg/ml
性狀：重組酶，催化ATP依賴的分子內(nèi)和分子間磷酸二酯鍵連接（5'-磷酸基團和3'-羥基末端），底物分子為多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA，分子之間的zui小的連接底物是核苷3'，5'-二磷酸，而分子內(nèi)連接的zui小底物是8個堿基的寡核苷酸。配套提供反應(yīng)緩沖液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯鍵的形成，使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羥基末端連接。作用底物包括單鏈RNA、DNA及二核苷焦磷酸。隨酶提供10X 反應(yīng)緩沖液
用途：生化研究。連接RNA和RNA ；RNA3'-末端標(biāo)記胞嘧啶3'，5'-雙[a-32P]磷酸； tRNA的特異性修飾；合成寡核苷酸的環(huán)化；寡聚脫氧核糖核苷酸與單鏈cDNA連接，用于5'RACE（快速擴增cDNA末端）分析
保存： -20°C

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T4 DNA連接酶
英文名稱：T4 DNA Ligase 
CAS號：9015-85-4
分子量：55.3kDa，單體
來源：含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度：30u/ul(200CEU/ul）
活性定義：是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中，37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量（weiss單位，1個weiss單位相當(dāng)于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位：20ul反應(yīng)體系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量） 

酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
50% PEG溶液：50%（w/v）聚乙二醇4000
抑制劑：當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時，可強烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活：65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意：聚乙二醇（PEG）可*地增加平末端DNA的連接效率，PEG4000在反應(yīng)體系中的*濃度為5%（w/v）；T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率，為避免此現(xiàn)象，電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下：樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存；轉(zhuǎn)化時，連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細胞體積中的10%；電轉(zhuǎn)化之前，先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase，然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制：測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測：粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀：液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途：科研、實驗。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接；雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接；雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù)；連接酶介導(dǎo)的RNA檢測；位點特異性突變；擴增片段長度多態(tài)性
貯存條件： -20°C貯存

FY2007    雷公藤次堿    CAS號：11088-09-8
FY2008    雷公藤春堿    CAS號：37239-48-8 
FY2009    雷公藤新堿    CAS號：41758-69-4
FY1401    硫辛酸    Alphalipoic acid
FY1402    連翹苷    Forsythin
FY1403    連翹酯苷A，連翹脂素    Forsythoside A
FY1404    連翹酯苷B    Forsythoside B
FY1405    L-脯氨酸    L-Proline
FY1406    L-甘氨酸    L-Glycine
FY1407    L-谷氨酸    L-Glutamic acid
FY1408    L-谷氨酰胺    L-Glutamine
FY1409    L-瓜氨酸    L-Citrulline
FY1410    L-胱氨酸    L-Cystine
FY1881    L-蘇氨酸    L-Threonine
FY1882    L-賴氨酸    L-Lysine
FY1883    L-賴氨酸鹽酸鹽    L-Lysine monohydrocholoride
FY1942    L-丙氨酸    L-Alanine
FY1943    β-丙氨酸    β-Alanine
FY1945    L-蛋氨酸（甲硫氨酸)    L-Methionin
FY1944    L-苯丙氨酸    L-Phenylalanine
FY1946    L-絲氨酸    L-Serine
FY1947    L-亮氨酸（白氨酸）    L-Leucine