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濟南天方機械有限公司
主營產(chǎn)品： 中藥粉碎機,超微粉碎機,中藥微粉機,中藥超微粉碎機,低溫粉碎機,細胞破壁機 |
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2012-12-5
愈風寧心片為葛根藥材乙醇提取物與葛根細粉經(jīng)混合制粒、壓片而成，《中國藥典》2000年版一部以葛根素作為指標成份控制；本品具有解頸止痛、增加腦及冠狀動脈血流量的作用。用于高血壓頭暈，
頭痛，頸項疼痛，冠心病，心絞痛，神經(jīng)性頭痛，早期突發(fā)性耳聾等病癥[1]。其主要有效成份為葛根素，據(jù)報道其口服給藥在動物體內(nèi)生物利用度較低，有關人體內(nèi)生物利用度的研究尚未見報道[2，3]。鑒
于固體口服制劑的生物利用度與藥物溶出度密切相關，我們研究了葛根細粉的粉碎工藝技術與愈風寧心片溶出度的關系，現(xiàn)報道如下。
1、儀器與試藥
BJ-2型崩解儀（天津市國銘醫(yī)藥設備公司）；RCZ-8A型智能藥物溶出儀（天津大學精密儀器廠）；LC-10A 液相色譜儀（LC-10AD 泵，SPD-10AUV 檢測器，C-R7A 數(shù)據(jù)處理機），Shim-Pack-ODS（6.0×150mm）柱；JL9200 激光粒度儀（濟南微納儀器有限公司）；葛根素對照品（中國藥品生物制品檢定所）；葛根藥材（購于陜西鎮(zhèn)平縣醫(yī)藥公司），經(jīng)鑒定為豆科植物野葛Pueraria lobata（Willd.）Ohwi的干燥根；SF-60 型普通粉碎機（常熟中藥制藥機械廠）；試驗型微粉機甲醇、乙醇為分析純。
2、實驗方法
2.1樣品制備
2.1.1葛根浸膏提取
取葛根粗粉850g，用85% 乙醇加熱回流提取三次，*次加8倍量提取4小時，第二、三次各加6倍量提取3小時，放出濾過，合并濾液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.32（70℃）放出即得。
2.1.2葛根細粉的制備及粒度分布檢查
細粉A：用普通粉碎機（羅底100目）將葛根片粉碎后再過200目細篩即得。
細粉B：每次取葛根片400g投進微粉機粉碎13分鐘（此時間經(jīng)實驗以100%過200目篩確定）放出即得。
粒度分布檢查：利用激光粒度儀對細粉A、細粉B的粒度（0.6～90µm）分布情況進行了檢測。
2.1.3片劑制備（素片）
片A：取葛根（850g）提取浸膏與細粉A 150g混合干燥，粉碎后過100目篩加適量淀粉、羧甲基纖維素混勻，用70% 乙醇潤濕制粒、干燥整粒，加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片（片重220mg）。
片B：取葛根（850g）提取浸膏與細粉B 150g 混合干燥，粉碎后過100目篩加適量淀粉、羧甲基纖維素混勻，用70% 乙醇潤濕制粒、干燥整粒，加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片（片重220mg）。
2.2溶出度研究
2.2.1色譜條件
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：甲醇-水（25∶75）；流速1ml•min-1；柱溫為室溫；檢測波長為250nm。
2.2.2崩解度測定
按《中國藥典》2000年版一部片劑通則項下崩解時限的檢驗方法，取三批片A樣測得的崩解時限分別為42±3min，44±2min，45±2min；取三批片B樣測得的崩解時限分別為43±3min，45±2min，
45±7min；均符合其規(guī)定。
2.2.3線性范圍
精密稱取葛根素對照品10mg，置25ml量瓶中，加30%乙醇稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，置10ml 量瓶中，用30%乙醇稀釋至刻度，在上述色譜條件下測定葛根素
色譜峰面積。以濃度C為橫坐標,峰面積A為縱坐標，按zui小二乘法進行線性回歸, 得回歸方程C=7.92×10-2A – 1.86×10-1,r=0.9992，葛根素含量在20～200µg•ml-1線性關系良好。
2.2.4樣品中葛根素含量測定
取愈風寧心片10片（素片），精密稱定，研細，取細粉約50mg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入30%乙醇50ml，閉塞稱定重量，超聲處理20min，稱定重量，用30%乙醇補足減失的重量，搖
勻，濾過，取續(xù)濾液作供試品溶液；取供試品溶液10µl，進樣測定，得片A的含量為13.62mg/片（n=3），片B的含量為17.43mg/片（n=3）。
2.2.5溶出度測定
按照《中國藥典》2000年版二部溶出度測定方法中的*法測定，以水為釋放介質(zhì)，每只轉(zhuǎn)籃中放置3片，測得的溶出量為平均溶出量；轉(zhuǎn)速為100r.min-1，平行對片A、片B各測6組。
3、結(jié)果
3.1細粉A、細粉B的粒度分布測試結(jié)果
表1 細粉A的粒度分布情況
序號 粒度（um） 體積% 累積% 序號 粒度（um） 體積% 累積%
1 0.6-1.2 0.000 0.00 15 27-30 2.302 14.59
2 1.2-3.0 0.000 0.00 16 30-34 2.532 17.12
3 3.0-4.5 0.006 0.01 17 34-38 3.276 20.40
4 4.5-6.2 0.372 0.38 18 38-42 3.757 24.16
5 6.2-7.6 0.534 0.91 19 42-46 4.102 28.26
6 7.6-9.2 0.802 1.71 20 46-50 4.306 32.57
7 9.2-11.4 0.871 2.58 21 50-54 4.402 36.97
8 11.4-12.8 1.089 3.67 22 54-58 4.688 41.66
9 12.8-14.2 1.102 4.77 23 58-62 10.372 52.03
10 14.2-15.8 1.123 5.89 24 62-66 14.249 66.28
11 15.8-17 1.151 7.04 25 66-70 17.901 84.18
12 17-20 1.301 8.34 26 70-75 15.618 99.80
13 20-24 1.682 10.02 27 75-80 0.201 100.00
14 24-27 2.266 12.29 28 80-90 0.000 100.00
表2 細粉B的粒度分布情況
序號 粒度（um） 體積% 累積% 序號 粒度（um） 體積% 累積%
1 0.6-0.9 0.000 0.00 15 14-17 5.167 32.32
2 0.9-1.3 1.824 1.82 16 17-20 6.079 38.40
3 1.3-2.0 3.445 5.27 17 20-24 6.890 45.29
4 2.0-2.5 1.216 6.48 18 24-28 7.599 52.89
5 2.5-3.2 0.810 7.29 19 28-32 7.801 60.69
6 3.2-4.0 1.014 8.31 20 32-36 7.497 68.19
7 4.0-5.2 1.419 9.73 21 36-40 7.36 75.58
8 5.2-6.0 0.912 10.64 22 40-45 7.194 82.78
9 6.0-6.8 1.216 11.85 23 45-52 6.687 89.46
10 6.8-7.7 1.722 13.58 24 52-60 5.268 94.73
11 7.7-8.7 2.330 15.91 25 60-70 3.445 98.18
12 8.7-9.9 3.040 18.95 26 70-75 1.732 99.91
13 9.9-12 3.749 22.70 27 75-80 0.089 100.00
14 12-14 4.458 27.15 28 80-90 0.000 100.00
注：200目篩孔內(nèi)徑為75μm，300目篩孔內(nèi)徑為47μm，5μm相當于2000目。
3.2溶出度測定結(jié)果
表3 愈風寧心片累積溶出率（%）
時間/min A B 時間/min A B
10 3.2±1.6 6.5±7.2 40 42.9±1.5 71.3±1.4
15 7.8±8.1 16.2±1.4 45 56.2±2.3 82.4±1.8
20 11.5±5.3 26.7±2.1 50 62.1±5.6 91.6±4.1
25 17.8±4.3 34.2±1.7 55 66.8±7.5 93.2±5.8
30 24.6±6.1 45.6±8.2 60 69.6±6.4 96.8±5.2
35 31.4±2.6 56.4±5.2
注：n=6
3.3片A、片B溶出度比較
表4 愈風寧心片溶出度比較
樣 品 T50/min P
A 43.2±6.1 <0.01
B 32.5±3.5
3.4同種粉碎工藝技術制備不同批次制劑的溶出度穩(wěn)定性比較
表5 愈風寧心片不同批次間溶出度比較
樣 品 批 號 T50/min P
010426 43.5±5.6
A 010427 48.6±2.6 <0.05
010428 58.5±6.2
010424 32.8±1.7
B 010422 33.2±3.4 >0.05
010421 33.0±1.2
4、討論
4.1植物細胞中的有效成份需經(jīng)過浸潤、溶脹、滲透和擴散方能溶出，超微粉碎技術一方面可使生藥細粉的表面積大大增加，提高藥物的溶出速度，從而有利于藥物的吸收[4]；另一方面超微粉碎技術
可使植物藥細胞破壁率達90%，從而使植物細胞中的有效成份直接暴露出來并進入體液，提高其生物利用度[5]，這是本實驗中超微粉碎技術制得的制劑溶出度遠大于普通粉碎技術制得的制劑的原因所在。
有關本實驗制劑的生物利用度有待進一步研究。
4.2固體制劑的溶出度與原輔料的物化性質(zhì)、制劑工藝等因素密切相關，不同廠家因采用不同的原輔料和生產(chǎn)方法，必然造成溶出度有較大差異，建議應通過研究對愈風寧心片溶出度作出統(tǒng)一的評價
標準及控制標準，以此保證其臨床療效。
4.3采用普通粉碎技術獲得的愈風寧心片不同批次間溶出度存在較大差異，原因可能與其獲得的藥粉不能全部位過篩有關，葛根纖維性較強，利用普通粉碎機不能加工至全部位達到微米中藥（1～75µm）
的細度，不僅每次粉碎所得的細粉在粒度上差異大，而且在所含組織或部位上亦有差異，進而所含有效成份也就不同；超微粉碎經(jīng)過試驗確定出全過篩（200目）粉碎時間是以藥材全部入
藥為前提的，所以各批次之間差異很小，由此看來，利用超微粉碎技術獲得的生藥粉制劑，更符合中醫(yī)處方用藥的要求。
4.4轉(zhuǎn)籃法測定溶出度通常為每籃放1片，考慮到本實驗含量測定方法的線性范圍及片劑的葛根素含量，改為每籃放3片。
