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產(chǎn)地	國產(chǎn)	級別	其他

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號
tNOS基因檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）	48T	AP3398

【檢測方法】

1 ．試劑準(zhǔn)備（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
將試劑盒各組分置4℃避光融化，充分混勻后瞬間離心。計(jì)算試劑使用份數(shù) N（N=樣本數(shù)+1 管陽性對照+1 管陰性對照），根據(jù)下表配置反應(yīng)體系mix，加入一適當(dāng)體積離心管中，充分混勻后瞬間離心，按 20μL 分裝至 PCR 反應(yīng)管/板，并轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

組分	體積（μL ）
qPCR 預(yù)混液（含酶）	16
引物探針	4
總體積（反應(yīng)體系 mix ）	20

2 ．樣本處理（樣本處理區(qū)）

① 核酸提取

選擇合適的盒提取核酸，具體按照相應(yīng)的試劑盒說明書操作。

② 加樣
在已加入反應(yīng)體系mix 的 PCR 反應(yīng)管/板上分別加入處理好的待檢標(biāo)本核酸、陰性對照、陽性對照各 5μL，終體積為 25μL。

蓋緊管蓋或封膜，瞬間低速離心后置熒光 PCR 檢測儀擴(kuò)增。

3 ．擴(kuò)增檢測（核酸擴(kuò)增區(qū)）

步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

①預(yù)變性

95℃

5min

1cycle

②變性

退火/延伸/檢測熒光

95℃

55℃

10s

40s

40cycles

【注意事項(xiàng)】

1．PCR 操作各階段應(yīng)嚴(yán)格分區(qū)操作，避免交叉污染。

2．試劑盒各組分使用前應(yīng)充分融化混勻，離心數(shù)秒后使用。

3．各組分不得與其他產(chǎn)品或不同批號的相應(yīng)成分進(jìn)行互換。

4．待測標(biāo)本若不及時(shí)檢測，應(yīng)保存于-20℃或-70℃。

5．樣品的處理應(yīng)該嚴(yán)格按照生物安全規(guī)范操作。

6．PCR 操作人員應(yīng)具有經(jīng)驗(yàn)和受過專業(yè)培訓(xùn)。

7．本試劑盒僅用于科研使用，不做為臨床診斷使用。

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